Щелочная фосфатаза у собак норма: Щелочная фосфатаза (ALP) у собак и кошек.

Автор: | 31.05.2023

Повышена щелочная фосфатаза у собаки — почему и что делать?

Точная диагностика заболеваний у животных невозможна без сдачи анализов. У здоровой собаки в крови содержится немало веществ в определенном количестве. Есть среди них и ферменты. Когда их количество понижено или повышено, это может быть свидетельством конкретных недугов. Один из таких ферментов называется щелочной фосфатазой. Узнаем о его предназначении и отклонениях от нормы, а также о других ферментах крови, на которые ориентируются в диагностике заболеваний животных.

О щелочной фосфатазе

Этот фермент обеспечивает гидролиз сложных эфиров фосфорной кислоты в щелочной среде. Он у псов содержится во всех тканях и органах, но больше всего его в слизистой оболочке кишечника, гепатоцитах (клетках печени), остеобластах (клетках-строителях костей), почечных канальцах, желчных протоках. Когда в организме животного происходят патологические процессы, проницаемость клеточных мембран повышается, клетки разрушаются. В них содержится большое количество щелочной фосфатазы. Фермент попадает в кровь собаки. Он обнаруживается при биохимическом анализе.

Стоит знать, что увеличение уровня щелочной фосфатазы не всегда является симптомом какого-либо собачьего недуга. Чтобы установить точный диагноз, нужна оценка всех биохимических показателей крови в сочетании с данными ультразвукового обследования, а если нужно, то и рентгенографии.

Ветеринары констатируют, что повышенный уровень в крови щелочной фосфатазы является нормой для молодых животных, поскольку их организм растет, в особенности скелет. Также такой показатель не является отклонением при заживлении переломов у животных и вынашивании потомства. А еще уровень этого фермента может повышаться, когда собаке назначают определенные лекарственные средства, к примеру, стероидные гормоны, противосудорожные медикаменты, нестероидные противовоспалительные препараты.

Патологическими причинами повышения щелочной фосфатазы в анализе крови пса могут быть панкреатит, синдром Кушинга, гипотериоз, сахарный диабет, закупорка желчных протоков либо их воспаление, гепатит (инфекционный в том числе), воспаление кишечника, рак молочных желез, новообразования в печени, желчном пузыре, абсцессы, аутоиммунные заболевания.

Внимательный и предусмотрительный хозяин собаки должен знать, что повышенный показатель щелочной фосфатазы в биохимическом анализе крови является поводом обследовать собаку комплексно. Не стоит при таком результате анализа сразу же назначать псу лечение, особенно гепатопротекторы. Да, после приема таких препаратов у собаки улучшатся показатели крови. Но надо найти истинную причину повышенного уровня фермента, диагностировать недуг, если он есть, или развеять сомнения.

О других ферментах крови собаки

Исследуя плазму, обращают внимание и на количество в ней общего белка. Под этим понятием подразумевают концентрацию альбумина и глобулина. Общий белок участвует в свертывании крови, иммунных реакциях, осуществляет транспортную функцию. Его нормой является показатель 60,0-80,0 г/л. Повышение может быть симптомом онкологических недугов собак, инфекционных заболеваний, обезвоживания организма. А вот пониженный белок может быть свидетельством заболеваний печени, панкреатита, хронических и острых кровотечений, заболеваний почек.

Панкреатическая амилаза — фермент, который участвует в расщеплении углеводов. Его норма составляет 35,0-70,0 г/л.

Повышенная амилаза может быть признаком панкреатита острой и хронической формы, острого перитонита, холецистита и почечной недостаточности. Снижение уровня панкреатической амилазы бывает результатом острого и хронического гепатита, недостаточности функции поджелудочной железы.

Функция фермента АЛТ (аланинаминотрансфераза) — участие в обмене аминокислот. Есть АЛТ в сердце, печени, почках, скелетной мускулатуре. Если клетки этих органов разрушаются в связи с различными патологическими процессами, то происходит выделение фермента в кровь собаки. Нормой принято считать АЛТ в плазме 1,6-7,6 МЕ. Выше этого уровня его содержание может быть при токсическом поражении печени или ее циррозе, сердечной недостаточности, некрозе скелетных мышц. А вот снижение уровня АЛТ наблюдается при дефиците в организме животных витамина В6, некрозе печени.

Биохимический и общий анализ крови у собак: расшифровка, нормы и отклонения

Статья проверена главным ветеринарным врачом Кончевой Елизаветой Сергеевной

Содержание

  1. Виды анализов крови у собак
  2. Общий анализ
  3. Биохимический анализ
  4. Нормы показателей крови
    • В общем анализе
    • В биохимическом анализе
  5. Отклонения показателей крови
    • Общий анализ
    • Биохимический анализ
  6. Как подготовить собаку к процедуре?
    • Как проходит забор крови?
  7. Ответы на часто задаваемые вопросы

Виды анализов крови у собак

Существует множество видов анализов и показателей крови у собак, мы обсудим самые важные из них: общий клинический анализ (ОКА) и биохимический анализ крови (БХ). Опытный клиницист, сопоставив анамнез и результаты анализов, может определить, какое направление выбрать при диагностике и как помочь пациенту.

Общий анализ

Общий анализ крови у собак покажет признаки инфекции, интенсивность воспалительного процесса, анемические состояния и другие отклонения.

Основные показатели:

  • Гематокрит (Ht) — процентный показатель количества эритроцитов по отношению к объему крови. Чем больше в крови эритроцитов, тем выше будет этот показатель. Это главный маркер анемии. Повышение гематокрита обычно не несет особого клинического значения, тогда как его понижение — плохой знак.

  • Гемоглобин (Hb) — белковый комплекс, содержащийся в эритроцитах и связывающий кислород. Как и гематокрит, играет основную роль в диагностике анемий. Его повышение может свидетельствовать о дефиците кислорода.

  • Эритроциты (RBC) — красные клетки крови, отвечают за транспорт кислорода и других веществ и являются самой многочисленной группой кровяных телец. Их количество близко коррелируется с показателем гемоглобина и имеет такое же клиническое значение.

  • Лейкоциты (WBC) — белые клетки крови, отвечают за иммунитет, борьбу с инфекциями. В эту группу входит несколько видов клеток, несущих различные функции. Соотношение разных форм лейкоцитов друг к другу называется лейкограммой и имеет высокое клиническое значение у собак.

    • Нейтрофилы — очень подвижны, способны проходить тканевые барьеры, покидать кровяное русло и обладают способностью к фагоцитозу (поглощению) чужеродных агентов, таких как вирусы, бактерии, простейшие. Существует 2 группы нейтрофилов. Палочкоядерные — незрелые нейтрофилы, они только-только попали в кровоток. Если их количество повышено, значит организм остро реагирует на заболевание, тогда как преобладание сегментоядерных (зрелых) форм нейтрофилов будет говорить о хроническом течении болезни.

    • Эозинофилы — немногочисленная группа крупных клеток, основная цель которых — борьба с многоклеточными паразитами.

      Их повышение почти всегда говорит о паразитарной инвазии. Однако нормальный их уровень не означает, что паразитов у питомца нет.

    • Базофилы — клетки, отвечающие за аллергическую реакцию и ее поддержание. У собак базофилы повышаются очень редко, в отличие от людей, даже если есть аллергия.

    • Моноциты — крупные клетки, которые способны выходить из кровяного русла и проникать в любой очаг воспаления. Именно они являются основным компонентом гноя. Повышаются при сепсисе (попадании бактерий в кровоток).

    • Лимфоциты — отвечают за специфический иммунитет. Встретившись с инфекцией, они “запоминают” возбудителя и учатся с ним бороться. Их повышение будет говорить об инфекционном процессе, могут они повышаться и при онкологии. Понижение будет говорить о иммуносупрессии, заболеваниях костного мозга, вирусах.

  • Тромбоциты — безъядерные клетки, основная функция которых — остановка кровотечения. Они всегда будут повышаться при кровопотерях, как компенсаторный механизм. Понижены они могут быть по двум причинам: либо они избыточно теряются (тромболитические яды, кровопотеря, инфекции), либо недостаточно образуются (опухоли, заболевания костного мозга и др.). Но нередко они занижены ошибочно, если в пробирке образовался тромб (артефакт исследования).

Биохимический анализ

Биохимия крови собаки поможет определить или предположить заболевания отдельных органов, но для правильной расшифровки результатов нужно понимать суть каждого показателя.

Основные показатели:

  • Альбумин — простой, растворимый в воде белок. Он участвует в огромном количестве процессов, от питания клеток до транспорта витаминов. Его повышение не имеет клинического значения, тогда как понижение может говорить о серьезных заболеваниях с потерей белка или нарушении его обмена.

  • АЛТ (аланинаминотрансфераза) — фермент, содержащийся в большинстве клеток организма. Наибольшее его количество содержится в клетках печени, почек, сердечной и мышечной мускулатуре. Показатель повышается при заболеваниях этих органов (особенно печени). Также это происходит после травм (из-за повреждения мышц) и при гемолизе (разрушение эритроцитов).

  • АСТ (аспартатаминотрансфераза) — фермент, как и АЛТ, содержащийся в печени, мышцах, миокарде, почках, эритроцитах, стенке кишечника. Его уровень почти всегда коррелируется с уровнем АЛТ, но при миокардите уровень АСТ будет выше уровня АЛТ, поскольку в миокарде АСТ содержится в большем количестве.

  • Альфа-амилаза — фермент, вырабатываемый в поджелудочной железе (ПЖ), для расщепления углеводов. Амилаза, как показатель, имеет малое клиническое значение. В кровь она попадает из 12-перстной кишки, соответственно, ее повышение может быть связано скорее с повышением проницаемости кишечника, нежели с заболеваниями ПЖ.

  • Билирубин — пигмент, содержащийся в желчи. Повышается при заболеваниях гепатобилиарной системы. При его повышении слизистые принимают характерный иктеричный (желтушный) оттенок.

  • ГГТ (гамма-глутамилтрансфераза) — фермент, содержится в клетках печени, поджелудочной железы, молочной железе, селезенке, кишечнике, но не содержится в миокарде и мышцах. Повышение его уровня будет говорить о повреждении тканей, в которых он содержится.

  • Глюкоза — простой сахар, используется как источник энергии. Изменения его количества в крови в первую очередь будут говорить о состоянии обмена веществ. Дефицит чаще всего будет связан с ее недостаточным поступлением (при голоде) или потерей (отравление, лекарства). Повышение будет свидетельствовать о серьезных заболеваниях, таких как диабет, почечная недостаточность и др.

  • Креатинин — продукт распада белка. Выводится почками, поэтому при нарушении их работы будет повышаться. Однако может быть повышен при обезвоживании, травмах, несоблюдении голода перед анализом крови.

  • Мочевина — конечный продукт распада белка. Мочевина образуется в печени, выводится почками. Повышается при поражении этих органов. Снижается — при печеночной недостаточности.

  • Щелочная фосфатаза — фермент, содержащийся в клетках печени, почек, кишечника, поджелудочной железы, плаценты, костях. При заболеваниях желчного пузыря ЩФ повышается почти всегда. Но может быть повышена и при беременности, энтеропатии, заболеваниях ротовой полости, в период роста.

Нормы показателей крови

В общем анализе

Таблица расшифровки норм показателей общего анализа крови у собак

Показатель

Взрослая собака, норма

Щенок, норма

Гемоглобин (г/л)

120-180

90-120

Гематокрит (%)

35-55

29-48

Эритроциты (млн/мкл)

5. 5-8.5

3.6-7.4

Лейкоциты (тыс./мкл)

5.5-16

5.5-16

Нейтрофилы палочкоядерные (%)

0-3

0-3

Нейтрофилы сегментоядерные (%)

60-70

60-70

Моноциты (%)

3-10

3-10

Лимфоциты (%)

12-30

12-30

Тромбоциты (тыс./мкл)

140-480

140-480

В биохимическом анализе

Нормы показателей биохимического анализа крови у собак

Показатель

Взрослая собака, норма

Щенок, норма

Альбумин (г/л)

25-40

15-40

АЛТ (ед. /л)

10-65

10-45

АСТ (ед./л)

10-50

10-23

Альфа-амилаза (ед./л)

350-2000

350-2000

Билирубин прямой

Билирубин общий

(мкмоль/л)

ГГТ (ед./л)

Глюкоза (ммоль/л)

4.3-6.6

2.8-12

Мочевина (ммоль/л)

3-9

3-9

Креатинин (мкмоль/л)

33-136

33-136

Щелочная фосфатаза (ед. /л)

10-80

70-520

Кальций (ммоль/л)

2.25-2.7

2.1-3.4

Фосфор (ммоль/л)

1.01-1.96

1.2-3.6

Отклонения показателей крови

Общий анализ

Расшифровка анализа крови у собак

Показатель

Выше нормы

Ниже нормы

Гемоглобин

Гематокрит

Эритроциты

Обезвоживание

Гипоксия (заболевания легких, сердца)

Опухоли ККМ

Анемия хронических заболеваний

Хроническая болезнь почек

Потеря крови

Гемолиз

Дефицит железа

Заболевания костного мозга

Длительное голодание

Лейкоциты

Инфекции (бактериальные, вирусные)

Недавний прием пищи

Беременность

Общий воспалительный процесс

Инфекции (например, парвовирусный энтерит)

Иммуносупрессия

Заболевания костного мозга

Кровотечение

 

Нейтрофилы палочкоядерные

Острое воспаление

Острая инфекция

Нейтрофилы сегментоядерные

Хроническое воспаление

Хроническая инфекция

Заболевания ККМ

Потеря крови

Некоторые инфекции

Моноциты

Инфекция

Опухоли

Раны

Заболевания ККМ

Кровопотеря

Иммуносупрессия

Лимфоциты

Инфекции

Опухоли (в т. ч. лимфома)

Заболевания ККМ

Кровопотеря

Иммуносупрессия

Вирусные инфекции

Тромбоциты

Перенесенные недавно кровопотери/травмы

Заболевания ККМ

Обезвоживание

Потеря крови

Гемолитические вещества (отравления, некоторые препараты)

Заболевания ККМ

Нарушение преаналитики

Биохимический анализ

Расшифровка биохимического анализа крови у собак

Показатель

Выше нормы

Ниже нормы

Альбумин

Обезвоживание

Печеночная недостаточность

Энтеропатия или нефропатия с потерей белка

Инфекции

Обширные поражения кожи (Пиодерма, атопия, экземы)

Недостаточное поступление белка

Выпоты/отеки

Потеря крови

АЛТ

Атрофия печени

Дефицит пиридоксина

Гепатопатия (неоплазия, гепатит, липидоз печени и др. )

Гипоксия

Отравление

Панкреатит

Травмы

АСТ

Атрофия печени

Дефицит пиридоксина

Гепатопатия

Отравление/интоксикация

Применение кортикостероидов

Гипоксия

Травма

Гемолиз

Панкреатит

Альфа-амилаза

Обезвоживание

Панкреатит

Заболевания почек

Энтеропатии/разрыв кишечника

Гепатопатии

Прием кортикостероидов

Билирубин

Гемолиз

Заболевания печени и желчного пузыря

ГГТ

Заболевания печени и желчного пузыря

Глюкоза

Голодание

Опухоли

Сепсис

Печеночная недостаточность

Поздние сроки беременности

Диабет

Беспокойство/страх

Гепатокожный синдром

Гипертиреоидизм

Инсулинорезистентность (при акромегалии, гиперадренокортицизме и др. )

Мочевина

Печеночная недостаточность

Потеря белка

Асцит

Голодание

Обезвоживание/гиповолемия/шок

Ожоги

Почечная недостаточность и другие поражения почек

Отравления

Креатинин

Беременность

Гипертиреоидизм

Кахексия

Обезвоживание/гиповолемия

Заболевания почек

Сердечная недостаточность

Высокое поступление белка (мясное кормление)

Щелочная фосфатаза

Заболевания печени и желчного пузыря

Терапия антиконвульсантами

Панкреатит

Молодой возраст

Заболевания зубов

Заболевания костей (резорбция, переломы)

Опухоли

 

Как подготовить собаку к процедуре?

Главное правило перед анализом крови — выдержать голод.

Для взрослых собак весом более 10 кг голод должен составлять 8-10 часов.

Маленьким собакам достаточно выдержать голод 6-8 часов, долго голодать им нельзя.

Для малышей до 4 месяцев достаточно выдержать голодную диету 4-6 часов.

Воду перед анализом ограничивать не стоит.

Как проходит забор крови?

В зависимости от ситуации, врач может взять анализ из вены передней или задней конечности.

Сначала накладывается жгут. Место введения иглы обрабатывают спиртом, после чего кровь собирается в пробирки.

Процедура, хоть и неприятная, но не очень болезненная. Животные чаще пугаются жгута, чем прокола иглой. Задача владельцев в этой ситуации — максимально успокоить питомца, разговаривать с ним и не бояться самим, если собака будет чувствовать, что боитесь вы, то испугается еще сильнее.

Ответы на часто задаваемые вопросы

Эта статья — первый шаг к решению проблемы!

Чтобы позаботиться о здоровье питомца, мы рекомендуем обратиться к специалисту

Спросить ветеринара

Статья была полезна?

Спасибо, давайте дружить!

Подписывайтесь на наш Инстаграмм

Спасибо за обратную связь!

Давайте дружить — скачайте приложение Petstory

УРОВЕНЬ ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФАТАЗЫ – Собаки

  • Хотя щелочная фосфатаза считается «ферментом печени», она также вырабатывается другими клетками.
  • На уровень щелочной фосфатазы могут влиять многие факторы, в том числе определенные лекарства и различные заболевания.
  • Если уровень щелочной фосфатазы вашего питомца не соответствует норме, могут быть рекомендованы дополнительные анализы для определения причины.

Что такое щелочная фосфатаза?

Щелочная фосфатаза (ALKP) представляет собой фермент, вырабатываемый многими типами клеток. Хотя он считается «энзимом печени», в основном он вырабатывается печенью и костями.

Уровень ALKP является важной частью скринингового теста крови (известного как биохимическая панель ), поэтому его часто оценивают во время плановых медицинских осмотров или предоперационного скрининга у здоровых домашних животных.

Поскольку на уровень ALKP могут влиять различные заболевания, ветеринарный врач может порекомендовать проверить уровень ALKP вашего питомца, если у вашего питомца есть какие-либо из следующих признаков болезни:

  • Рвота
  • Диарея
  • Потеря аппетита
  • Вялость (усталость)
  • Повышенное питье и/или мочеиспускание
  • Потеря или увеличение веса
  • Боль в животе или его увеличение

Как измеряется уровень щелочной фосфатазы?

Чтобы проверить уровень ALKP вашего питомца, ваша ветеринарная бригада должна получить небольшой образец крови. Эта процедура обычно очень быстрая; это может занять всего несколько секунд, если пациент ведет себя хорошо. Для пациентов, которые очень напуганы или ведут себя плохо, ваша ветеринарная бригада может использовать намордник, полотенце или другое мягкое ограничивающее устройство. В некоторых случаях, например, у пациентов с очень густым мехом, может потребоваться сбрить волосы в области, откуда будет взята кровь. Волосы отрастут, и часто это хороший способ быстро найти вену.

Иногда кровь можно брать в комнате для осмотра, потому что некоторые домашние животные успокаиваются и ведут себя хорошо в присутствии своих владельцев. Тем не менее, некоторые домашние животные становятся более возбужденными и непослушными, когда их владельцы присутствуют, поэтому ваш ветеринар может порекомендовать отвести вашего питомца в отдельную зону обработки для взятия крови.

В некоторых ветеринарных кабинетах есть собственное оборудование для анализа крови, поэтому они могут провести тест на ALKP в офисе и получить результаты в тот же день. Другие офисы отправляют образцы крови в стороннюю лабораторию для проведения анализа. Если используется внешняя лаборатория, результаты обычно доступны в течение 1-2 дней.

Поскольку недавний прием пищи изменяет состав крови и может повлиять на уровень ALKP, ваш ветеринар может порекомендовать вашему питомцу не есть в течение 12 часов перед взятием крови для проведения теста. В большинстве случаев вы все же можете давать своему питомцу воду. Пожалуйста, сообщите своему ветеринару, если это временное голодание будет проблемой для вас или вашего питомца.

Обязательно сообщите своему ветеринару о любых лекарствах или добавках, которые может получать ваш питомец, так как некоторые продукты могут изменить уровень ALKP.

О чем говорит уровень щелочной фосфатазы вашему ветеринару?

Многие факторы могут влиять на уровень ALKP. Некоторые лекарства, такие как стероиды, могут повышать этот уровень. Кроме того, на уровень ALKP могут влиять различные заболевания.

Серьезных заболеваний, вызывающих слишком низкий уровень ALKP, не существует. Большинство состояний, влияющих на этот фермент, вызывают повышение его уровня в крови. Ниже приведены несколько условий, которые вызывают повышенный уровень ALKP:

  • Быстрорастущие (молодые животные)
  • Панкреатит (воспаление поджелудочной железы)
  • Болезнь желчного пузыря
  • Гепатит (воспаление печени)
  • Печеночная недостаточность
  • Рак, поражающий печень или кости
  • Гиперадренокортицизм (болезнь Кушинга)
  • Диабет
  • Токсическое поражение печени

Если у вашего питомца аномальный уровень ALKP, ваш ветеринар объединит эту информацию с другой жизненно важной информацией о вашем питомце, чтобы решить, рекомендуется ли дальнейшее диагностическое тестирование для изучения аномального результата. В зависимости от общего состояния вашего питомца ветеринарный врач может порекомендовать лекарства, диетотерапию или другое лечение.

Если у вашего питомца в анамнезе был повышенный уровень ALKP (с признаками болезни или без них), ваш ветеринар может порекомендовать повторно проверить уровень в какой-то момент, чтобы проследить, меняется ли он. Дополнительное тестирование может быть рекомендовано, если уровень не возвращается к норме.

Существуют ли риски, связанные с определением уровня щелочной фосфатазы?

Существует очень мало рисков, связанных с тестированием уровня ALKP. Забор крови занимает всего несколько секунд, и ваша ветеринарная бригада примет меры предосторожности, чтобы ваш питомец не пострадал во время этой процедуры. После получения крови вся дальнейшая обработка проводится в ветеринарном кабинете или в диагностической лаборатории, поэтому риск причинения вреда вашему питомцу отсутствует.

Альп | eClinpath

Синонимы

Щелочная фосфатаза сыворотки (SAP, SALP, ALP) или щелочная фосфатаза плазмы

Физиология

Щелочная фосфатаза (ALP, AP) представляет собой неспецифический металлофермент, который гидролизует многие типы щелочных эфиров фосфорной кислоты. рН в присутствии ионов цинка и магния. В основном ЩФ используется в качестве чувствительного индикатора холестаза у собак (он будет повышаться раньше, чем уровень билирубина), однако он неспецифичен, поскольку кортикостероиды (экзогенный или эндогенный «стресс») индуцируют выработку этого фермента с последующим увеличением в сыворотке крови. или активность плазмы. Однако у кошек ЩФ является специфическим индикатором заболевания печени, в то время как у крупных животных этот фермент менее полезен, поскольку он нечувствителен, холестатические нарушения встречаются нечасто, а референтные интервалы довольно широки.

Изоферменты и изоформы ЩФ

Существует два изофермента (продукты разных генов) и несколько изоформ (полученных в результате посттрансляционной модификации изоэнзимов) ЩФ. Изоферменты образуются из кишечных и тканевых неспецифических генов ЩФ и различаются аминокислотной последовательностью. Изоформы различаются каталитическими сайтами и активностью, иммуногенностью и электрофоретической подвижностью. Основными изоформами, которые можно измерить у животных, являются печеночная ЩФ (L-ЩФ), кортикостероидная ЩФ (С-ЩФ; только у собак), костная ЩФ (В-ЩФ) и кишечная ЩФ (I-ЩФ). но есть и другие, включая лейкоцитарную ЩФ и плацентарную ЩФ.

  • Ген/изофермент кишечной АЛФ: Образует изоформы C-ALP и I-ALP. C-ALP уникален для собак и индуцируется кортикостероидами (эндогенными или экзогенными). Несмотря на то, что он является продуктом кишечного гена, на самом деле он вырабатывается в гепатоцитах, а не в эпителии кишечника.
  • Ген/изофермент тканевой неспецифической ЩФ: Образует остальные изоформы ЩФ, включая L-АЛП, В-ЩФ, плацентарную ЩФ и лейкоцитарную ЩФ.

Органная специфичность

ЩФ при лейкемии собак

ЩФ представляет собой белок, связанный с клеточной мембраной, присутствующий во многих тканях. Он прикрепляется к клеточным мембранам белками гликофосфатидилинозитола (GPI). Расщепление этих белков желчными кислотами, фосфолипазой D и протеазами высвобождает ЩФ из мембран, что приводит к повышению активности ЩФ в сыворотке/плазме.

  • Печень: Гепатоциты и эпителий желчевыводящих путей являются источником изоформы L-ALP (все виды) и изоформы C-ALP у собак. Экспрессия ЩФ обычно ограничена канальцевой мембраной гепатоцитов, но может индуцироваться (обычно вследствие холестаза, но также и кортикостероидами) на синусоидальной мембране (где она может легко высвобождаться в кровь).
  • Кости: Эта изоформа вырабатывается остеобластами, и ее уровень в сыворотке увеличивается в связи с активностью остеобластов (молодые животные, некоторые заболевания костей). Высокие концентрации ЩФ в сыворотке также можно наблюдать при остеосаркоме, злокачественном новообразовании из остеобластов.
  • Ткани кишечника, почек, молочной железы, плаценты: Обычно они не являются важными источниками повышенной активности ЩФ в сыворотке, хотя некоторая изоформа плаценты присутствует в сыворотке поздних беременных самок (Everett et al 1977) и кобыл (Дюма и Спано, 1980). Слегка повышенная активность ЩФ наблюдается у собак с различными типами опухолей молочной железы (Karayannopoulou et al., 2006).
  • Лейкоциты: Экспрессия клеточной линии зависит от вида. Монобласты собак (незрелые моноциты) и эозинофилы богаты ЩФ, как и нейтрофилы лошадей (Stokol et al 2015). Присутствие ЩФ в клетке можно обнаружить путем нанесения специфического для ЩФ субстрата на цитологические мазки — этот метод (обнаружение ферментов на основе их способности расщеплять субстрат) называется цитохимическим окрашиванием. В Корнельском университете мы используем цитохимическое окрашивание ALP в качестве маркера миелоидных клеток при остром лейкозе. Хотя опухолевые монобласты могут экспрессировать ALP в своей цитоплазме, высокая активность ALP в сыворотке или плазме обычно наблюдается редко (Froment and Bédard 2016). Цитохимическое окрашивание на ALP также используется для дифференциации остеобластов от других мезенхимальных клеток в цитологических аспиратах опухолей, т. е. высокая экспрессия ожидается в остеосаркомах, но не в хондросаркомах или фибросаркомах (Barger et al 2005). Мы используем цитохимическое окрашивание ALP, чтобы помочь подтвердить диагноз остеосаркомы в цитологических образцах.

Период полураспада

Период полураспада ALP зависит от источника (изоформы) и вида (Hoffman and Dorner 1977, Hoffman et al 1977). Изоформы с более длительным периодом полураспада вносят больший вклад в нормальные и повышенные уровни ЩФ в сыворотке или плазме, то есть повышенные уровни изоформ с очень коротким периодом полувыведения (минуты по сравнению с днями) вряд ли будут наблюдаться в одном образце крови (поскольку пик может быть пропущено, и значения будут быстро уменьшаться).

Период полураспада
Изоформа Виды Период полувыведения (часы)
Печень (L-ALP) Собака 2-3 ​​дня (66 часов)
  Кошка 6 часов
Стероид (C-ALP)
Собака 2-3 ​​дня (74 часа)
Кишечный (I-ALP), почечный, плацентарный Собака/лошадь <6 минут
  Кошка < 2 минут
Кость (B-ALP) Собака 2-3 ​​дня
  Другие виды ?

 

Методы

Ниже приведен метод, используемый для измерения общей активности ЩФ на нашем химическом анализаторе в Корнельском университете.

Тип реакции

Конечная точка

Процедура

В одностадийной реакции ALP расщепляет p -нитрофенилфосфат на фосфат и p -нитрофенол. Генерация п-нитрофенола измеряется фотометрически и пропорциональна активности ЩФ. Эта реакция происходит в присутствии ионов магния и цинка (таким образом, измерение ЩФ нельзя проводить в ЭДТА, так как это хелатирует магний и цинк).

p — Нитрофенилфосфат + H 2       ALP        > p -нитрофенол (желтый) + фосфат

Единицы измерения

определяется как количество фермента, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата в минуту при определенных условиях. Формула преобразования показана ниже:

Е/л x 0,0167 = мккат/л

Измерение изоформ

Дифференцировку изоформ можно проводить электрофорезом (аффинный электрофорез в агарозе, иммуноанализ, электрофорез ацетата целлюлозы или изоэлектрическое фокусирование на агарозе) или методами дифференциального ингибирования с использованием левамизола (особенно ингибирует L-ALP и B-ALP), нагревания (инактивирует L-ALP и B-ALP) и лектин зародышей пшеницы (осаждает B-ALP и C-ALP) (Wellman et al 1982, Syakalima et al 1997, Allen et al 2000, Hatayama et al 2011)

Рекомендации по образцам

Тип образца


Сыворотка или плазма

Антикоагулянт

Гепарин (литий, натрий, аммоний). ЭДТА использовать нельзя.

Стабильность

Стабильность активности ЩФ в образцах сыворотки и плазмы человека следующая: 7 дней при 15–25 °C или 2–8 °C и 2 месяца при замораживании при температуре около -20 °C. Сообщается, что в плазме или сыворотке животных ЩФ стабилен в течение 2-3 дней при охлаждении.

Помехи

  • Липемия/мутность, желтуха: Никаких существенных выводов.
  • Гемолиз: Может повышать ЩФ при тяжелом гемолизе (>500 индекс гемолиза)
  •  

Интерпретация теста

Рутинное измерение ЩФ дает общую активность в сыворотке (все изоформы) без указания источника. У здоровых животных преобладающей изоформой в крови является L-ALP, за которой следует B-ALP. Доля В-ЩФ выше у молодых животных (указывает на активность остеобластов при росте). Изоформа C-ALP вносит лишь небольшой вклад в общую активность ALP в сыворотке. Доля C-ALP увеличивается с возрастом у собак.

Измерение изоформ чаще всего применяется к образцам собак, чтобы различить изоформы L-ALP и C-ALP в случаях с повышенной активностью общей ЩФ в сыворотке по неустановленной причине (чтобы определить, связано ли повышение общей ЩФ с заболеванием печени или эндогенными кортикостероидами). Однако это не очень надежный тест для этой цели, потому что любое хроническое заболевание (в том числе поражающее печень) может привести к высвобождению эндогенных кортикостероидов (хронический стресс), что приведет к увеличению уровня C-ALP.

Нас больше всего беспокоит повышение активности ЩФ, однако неожиданно низкая активность ЩФ (например, у молодых растущих животных) может быть маркером дефицита гормона роста (Bakhtiani and Burgener 2019), но вряд ли специфична для этого.

Повышенная активность ЩФ

Окрашивание ЩФ в печени

Повышение активности ЩФ в сыворотке обычно связано с печенью, костями и изоформами, индуцируемыми кортикостероидами (помните, что собаки — единственные виды, у которых есть изоформы, индуцируемые стероидами). Поэтому мы связываем высокую активность ЩФ с холестазом, повышенную остеобластическая активность (не остеолиз) и стероиды (только у собак). Повышение ЩФ в сыворотке или плазме за счет увеличения других изоформ наблюдается редко, вероятно, потому, что фермент высвобождается в просвет органов или имеет очень короткий период полувыведения (см. таблицу выше).

  • Физиологические:
    • Возраст: Активность ЩФ у молодых, растущих животных всех видов может быть в 2-10 раз выше, чем у взрослых, из-за повышенной изоформы В-ЩФ. Значения снижаются в течение 3-месячного возраста и находятся в пределах взрослых диапазонов к 15-месячному возрасту. У новорожденных также наблюдается повышенный уровень ЩФ; считается, что это происходит либо из-за высокого уровня ЩФ в молозиве, либо из-за индуцированного производства ЩФ в результате фактического приема молозива.
    • Порода собак: Некоторые сибирские хаски имеют доброкачественную (транзиторную) семейную гиперфосфатаземию. Это характеризуется высокой активностью ЩФ (> 1100 ЕД/л в возрасте 11 недель и > 700 ЕД/л в возрасте 16 недель). Это не связано с какими-либо клиническими эффектами и связано в первую очередь с изоформой кости (Lawler et al 1996). Сообщалось также о высокой активности ЩФ у шотландских терьеров, но это может быть вторичным по отношению к лежащей в основе субклинической дисфункции надпочечников (увеличение связано с C-ALP) (Zimmerman et al 2010, Cortright et al 2014; подробнее см. ниже), что может быть генетический дефект этой породы.
    • Эндогенное высвобождение кортикостероидов (хронический стресс): Первоначально повышение ЩФ обусловлено изоформой L-ЩФ; изоформа C-ALP индуцируется в течение нескольких дней (до 10). Это только у собак
  • Лекарства или гормоны
    • C-ALP (только для собак): Эта изоформа индуцируется экзогенными кортикостероидами (Solter et al 1994).
    • Индукция L-ALP лекарствами:  
      • Сообщалось, что противосудорожные препараты (например, фенобарбитал, примидон) увеличивают активность ЩФ, что объясняется индукцией (стимуляцией экспрессии генов) (Müller et al 2000), но увеличение может быть связано с лекарственным поражением печени.
      • Кортикостероиды будут влиять на активность ЩФ в разной степени у собак, в зависимости от состава или дозы, с сохранением повышения до 3 недель после прекращения терапии однократной подкожной дозой метилпреднизолона 1,1 мг/кг (Ginel et al 2002). В одном исследовании лечение собак преднизоном в дозе 4 мг/кг в течение 32 дней первоначально увеличивало L-ALP, а затем C-ALP через 5-7 дней (Sanecki et al 1987). Повышение активности ЩФ выше референтных интервалов из-за лечения кортикостероидами у других видов не зарегистрировано. Было показано, что увеличение L-ALP после кортикостероидов связано с индукцией синтеза (Wiedmeyer et al 2002).
  • Патофизиологические:
    • Заболевания гепатобилиарной системы: Повышение ЩФ (прежде всего, изоформы L-ЩФ) используется в качестве индикатора холестаза (внутри- или внепеченочного, преимущественно структурного) у животных. Накопление желчных кислот в гепатоцитах стимулирует продукцию L-ALP. В одном исследовании с участием 270 собак с гистологическими признаками заболевания печени и без него самая высокая активность ЩФ наблюдалась у собак со стероидной гепатопатией, холестазом (например, обструкцией желчных протоков), хроническим гепатитом и некрозом печени (последнее могло быть связано с одновременным локализованным структурным поражением печени). или функциональный холестаз) (Center et al 1992). У кошек ЩФ считается специфическим, но нечувствительным маркером гепатобилиарного заболевания, поскольку уровень ЩФ повышается реже у 54 кошек с гистологическими признаками заболевания печени (Center et al 1986). Повышение активности ЩФ происходит при заболеваниях гепатобилиарной системы у кошек, особенно при липидозе печени, холангиогепатите-холангите, обструкции внепеченочных желчных протоков и опухолях печени (например, лимфоме), но это повышение менее достоверно и имеет меньшую величину по сравнению с аналогичными ситуациями у собак (Center и др. 1986, Центр и др., 1992). Более низкая концентрация ЩФ в цитоплазме кошачьих гепатоцитов и короткий период полураспада этого фермента у кошек (6 часов) заставляет многих клиницистов считать, что небольшие изменения ЩФ необходимо исследовать у кошек. Широкий спектр активности ЩФ и нечувствительность этого теста к холестазу у крупных животных ограничивают применимость ЩФ у этих видов. У лошадей повышение билирубина из-за холестаза может предшествовать повышению ЩФ (личные наблюдения). По этой причине ЩФ больше не включается в наши биохимические панели для крупных животных или панели печени.
      • Структурный холестаз:  Это связано с физическим препятствием оттоку желчи, которое может быть внутрипеченочным или внепеченочным (или их комбинацией).
        • Внепеченочный холестаз (обструкция желчных протоков): Вызывает резкое повышение ЩФ. Повышение ЩФ может происходить до развития желтухи или повышения концентрации общего или прямого билирубина, особенно у собак или при локализованном холестазе. Панкреатит (острый или хронический) может привести к повышению уровня ЩФ из-за отека и/или фиброза вокруг желчных протоков (особенно у кошек из-за их общего желчного протока и протока поджелудочной железы).
        • Внутрипеченочный холестаз: Локализованный или генерализованный холестаз из-за отека гепатоцитов будет индуцировать ЩФ (мы наблюдали цитологические признаки холестаза, например, желчные цилиндры в аспирате печени у собак с повышенной ЩФ, но не с концентрацией прямого или общего билирубина). Поражения, которые в первую очередь центрилобулярные, обычно вызывают лишь незначительное повышение ЩФ, в то время как поражения, затрагивающие периферию (перипортальные области) дольки, обычно приводят к более резкому повышению в результате нарушения оттока желчи. Причины внутрипеченочного холестаза включают неоплазию (первичную или метастатическую), липидоз печени (заметное увеличение возможно при идиопатическом липидозе печени у кошек — липидоз является причиной наиболее резкого повышения активности ЩФ у этого вида, часто без одновременного увеличения ГГТ, что является полезным диагностическим признаком), острое гепатоцеллюлярное повреждение (внутрипеченочный холестаз возникает из-за гепатоцеллюлярного отека; ожидается одновременное повышение активности АЛТ у собак и кошек или СДГ/ГЛДГ у крупных животных), а также перипортальный фиброз и воспаление (возможно заметное увеличение).
      • Функциональный холестаз: Определяется как снижение оттока желчи из-за опосредованного цитокинами подавления или ингибирования транспортеров, ответственных за экскрецию солей желчных кислот или конъюгированного билирубина в желчь. Это происходит без какого-либо физического препятствия или нарушения оттока желчи. Это было зарегистрировано у собак с инфекциями E. coli . Вероятно, это происходит и у других видов. Цитокин-опосредованный холестаз обычно характеризуется высоким уровнем общего билирубина (за счет прямого и непрямого билирубина) с умеренным увеличением ферментов гепатоцеллюлярной утечки (АЛТ, АСТ, СДГ, ГЛДГ). Уровни ALP могут быть нормальными в этом состоянии.
      • Неоплазия: При первичном раке печени (гепатоцеллюлярном/билиарном) возможно заметное повышение ЩФ (из-за L-ЩФ или С-ЩФ у собак). Метастатическая неоплазия в печень часто увеличивает ЩФ из-за локализованного холестаза. Во многих случаях неоплазии печени ЩФ может быть единственным ферментом, уровень которого повышен на панели. В одном исследовании 114 шотландских терьеров с дисфункцией надпочечников, вакуолярной или связанной с медью гепатопатией активность ЩФ существенно не различалась у животных с гепатоцеллюлярной карциномой и без нее (Cortright et al 2014).
      • Острое гепатоцеллюлярное повреждение: Как упоминалось выше, повышение активности ЩФ от легкой до умеренной степени связано с внутрипеченочным холестазом, связанным с гепатоцеллюлярным отеком, а не с гепатоцеллюлярным повреждением как таковым. Можно ожидать одновременно высокие значения ALT, SDH и GLDH.
    • Гиперадренокортицизм у собак:   Уровни варьируют от умеренных до выраженных (до 100 раз) и часто обусловлены индукцией изоформы C-ALP (хотя также наблюдается увеличение L-ALP) у собак. До 83-100% собак с болезнью Кушинга имеют высокие уровни C-ALP, но хронический эндогенный стресс (из-за любого основного заболевания) может повышать C-ALP и общую ALP в сыворотке (до 2-3 раз выше нормы). Таким образом, активность C-ALP является чувствительным, но неспецифическим тестом на гиперадренокортицизм у собак.
    • Дисфункция надпочечников у собак : Заболевание надпочечников, вызывающее повышение секреции половых гормонов или кортизола, связано с повышенной активностью ЩФ (до 22 000/мкл) у шотландских терьеров (Cortright et al 2014).
    • Внепеченочная неоплазия: Доброкачественные или злокачественные опухоли молочных желез у собак связаны с повышением ЩФ, независимо от наличия метастазов или наличия костной метаплазии. Повышение активности ЩФ, как правило, незначительное (медианное значение активности ЩФ 170 ЕД/л, в пределах от 50 до 480 ЕД/л), с повышением активности костей, печени и изоформ кортикостероидов (Karayannopoulou et al 2006). ALP, возможно, имеет миоэпителиальное клеточное происхождение. Собаки с остеосаркомой (опухоль из остеобластов) могут иметь высокие концентрации ЩФ, что является отрицательным прогностическим показателем (Boerman et al 2012), при этом активность > 120 ЕД/л в некоторых исследованиях связана с плохим прогнозом. Высокий уровень ALP может быть связан с пролиферативной природой новообразования, однако клеточные линии, полученные от пациентов с высокой или низкой активностью сыворотки, не показали различий в скорости пролиферации in vitro (Holmes et al 2015).
    • Повышенная активность остеобластов (неопухолевая): Активность остеобластов в ответ на гормоны (паратиреоидный гормон, тироксин) может повышать общую ЩФ в сыворотке из-за изоформы В-ЩФ.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *