Противовирусная сыворотка для кошек: Купить Глобфел — 4 сыворотка для кошек в зоомагазине ПоводОК.

Витафел С (сыворотка)

Описание Витафел-С сыворотка крови кошек:

Витафел-С является одним из наиболее эффективных средств для лечения вирусных заболеваний у кошек, таких как калицивирус, ринотрахеит, хламидиоз, панлейкопения. А также его назначают в профилактических целях перед посещением выставок и питомников, при смене жилья, перед вязкой или перед передачей другому хозяину.

Производители ветеринарных препаратов Витафел для кошек создают из сыворотки кошек-доноров, которые гипериммунизированы антителами выше перечисленных инфекций. Для лечебного эффекта лучше всего Витафел сыворотку использовать в самом начале заболевания. Параллельно с лекарством назначают противовирусные препараты, витамины, пробиотики, антибиотики и иммуностимуляторы. Результат от такой комплексной терапии будет достаточно быстрым и наиболее эффективным.

Назначается препарат Витафел-С по инструкции, и животному до 10 кг для профилактических целей достаточно однократно ввести 1 ампулу (1 мл сыворотки). Кошкам свыше 10 кг препарат вводится в дозировке 2 мл, т.е. 2 ампулы, дважды, соблюдая интервалом между инъекциями в 24 часа. После чего через 2 недели проводится активная вакцинация животных.

Для лечения конъюнктивитов, вызванных калицивирусом, герпесвирусом или хламидиями, можно Витафел купить в каплях. Закапывать глаза следует 2 – 3 раза в сутки, капая по 1 – 3 капли в каждый глаз.

Отзывы о применении препарата

По отзывам известных заводчиков Витафел для кошек необходим при подготовке к посещению публичных мероприятий, например выставок, конкурсов. В общественном месте легко подхватить инфекцию, которая надолго выбьет вашего любимца из колеи. Что нужно сделать, чтобы подготовить животное:

Приобретается Витафел-С – сыворотка крови кошек, минимум за три дня до мероприятия.

Взять шприцом одну или две дозы препарата (см. инструкцию, зависит от веса кошки).
Поставить укол, неглубоко, подкожно. Желательно, чтобы кто-то из членов семьи придерживал питомца.
Таким образом, Витафел для кошек имеет два глобальных назначения: профилактика распространённых инфекционных заболеваний, выработка иммунитета к опаснейшим кошачьим болезням:

ринотрахеит;
калицивироз;
панлейкопения.
Сделав укол кошке-матери, когда котята ещё питаются грудным молоком, вы иммунизируете потомство.

Производитель: ООО «НПБЦ ЛИНИЯ АЛЬБА»

5 — инструкция по применению

Инструкция по применению сыворотки поливалентной Гискан-5 против чумы плотоядных,

парвовирусного, коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций собак
(организации-разработчик — ООО «Ветбиохим», г. Москва)

I. Общие сведения
Торговое наименование — Гискан-5.
Международное непатентованное наименование — сыворотка поливалентная против чумы плотоядных, парвовирусного, коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций собак.

Лекарственная форма — раствор для инъекций.
Гискан-5 — сыворотка крови лошадей, содержащая специфические антитела к возбудителям чумы собак, парвовирусного и коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций собак.
По внешнему виду сыворотка представляет собой слегка опалесцирующую жидкость желтоватого или желтовато-коричневатого цвета. При хранении допускается образование незначительного осадка, который при взбалтывании легко разбивается в равномерную взвесь.

Сыворотка расфасована по 2,0 мл (1 коммерческая доза) во флаконы (ампулы) соответствующей вместимости. Флаконы укупорены резиновыми пробками, укрепленными алюминиевыми колпачками, ампулы герметично запаяны. Флаконы (ампулы) упакованы в картонные (пластиковые) коробки или блистеры (по 10 флаконов). В каждую коробку вложена инструкция по применению препарата.
Срок годности сыворотки — 2 года от даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования. По истечении срока годности сыворотка к применению не пригодна.

Гискан-5 хранят и транспортируют в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 10°С. Следует хранить в местах, недоступных для детей.

Флаконы с сывороткой, содержащие постороннюю примесь, не разбивающийся при встряхивании осадок, с нарушенной укупоркой, а также остатки сыворотки, не использованные в день вскрытия флаконов, выбраковывают и обезвреживают путем кипячения в течение 15 мин с последующей утилизацией.
Утилизация обеззараженной сыворотки не требует соблюдения специальных мер предосторожности.

II. Биологические свойства
Сыворотка Гискан-5 при введении собакам с профилактической целью обеспечивает пассивный иммунитет против чумы, парвовирусного, коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций, который сохраняется в течение 2 недель.

Сыворотка обладает лечебными свойствами, максимально проявляющимися в инкубационном и продромальном периодах инфекционного процесса.

III. Порядок применения
Гискан-5 применяют для профилактики и лечения чумы плотоядных, парвовирусного, коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций собак.

Запрещено вводить сыворотку собакам, больным и ослабленным с клиническими признаками других инфекционных болезней.

Сыворотку Гискан-5 вводят подкожно или внутримышечно, соблюдая общепринятые правила асептики, для инъекции используют только стерильные материалы и инструменты. Для каждого животного используют отдельную иглу.

Для профилактики чумы плотоядных, парвовирусного, коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций собак животным массой до 5 кг препарат вводят однократно по 1,0 мл, свыше 5 кг — однократно 2,0 мл.
С лечебной целью Гискан-5 вводят в указанных дозах 1-3 раза с интервалом 12-24 часа в зависимости от тяжести патологического процесса. Наибольший терапевтический эффект достигается при использовании сыворотки в начальной стадии болезни.

Случаев передозировки при применении препарата не установлено.
При введении препарата у отдельных собак может наблюдаться незначительное повышение температуры тела и аллергические реакции. Для исключения указанных явлений рекомендуется за 10-15 мин до применения Гискана-5 ввести животному парентерально один из антигистаминных препаратов (димедрол, супрастин, тавегил, дипразин и т.д.).

Следует избегать нарушений схемы применения сыворотки, поскольку это может привести к снижению профилактического и лечебного эффекта.
При применении препарата в соответствии с настоящей инструкцией побочных явлений и осложнений, как правило, не отмечается.
Гискан-5 можно применять в комплексе с антибиотиками, сульфаниламидами, пробиотиками, а также препаратами, предназначенными для симптоматического лечения. Сыворотку не применяют в одном шприце с другими биопрепаратами и лекарственными средствами.

Сроки возможного использования продукции животного происхождения после введения сыворотки не устанавливаются.

IV. Меры личной профилактики
При работе с препаратом следует соблюдать общие правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами ветеринарного назначения.
Все лица, участвующие в проведении работы должны быть одеты в спецодежду (халат, брюки, головной убор, резиновые перчатки). В местах работы должна быть аптечка первой доврачебной помощи.
При попадании препарата на кожу и/или слизистые оболочки их рекомендуется промыть большим количеством водопроводной воды. При случайном введении препарата человеку место введения необходимо обработать 70%-ным раствором этилового спирта, обратиться в медицинское учреждение и сообщить об этом врачу.

Организация-производитель: ООО «Ветбиохим». Адрес производства: 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 16.

С утверждением настоящей инструкции утрачивает силу инструкция по применению сыворотки поливалентной Гискан-5, утвержденная Россельхознадзором 27 января 2011 г.

Глобфел-4 для кошек: эффективное средство против вирусных инфекций

Глобфел-4 для кошек – это сыворотка для иммунизации, которая обеспечивает питомцам пассивный иммунитет, эффективный против ринотрахеита, панлекопении, хламидиоза кошек и кальцивироза. Лекарство применяется как для профилактической, так и для лечебной цели и позволяет сформировать иммунитет, активный до 2 недель.

Описание препарата

Глобфел-4 представляет собой бесцветную или слегка желтоватую мутную жидкость, выпускаемую во флаконах или ампулах. На дне емкости жидкость может образовывать осадок, который легко растворяется при встряхивании. Препарат выпускается во флаконах объемом по 3 мл, герметично запаянных резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками. Флаконы или ампулы упакованы в картонную коробку, к которой прилагается инструкция по применению.

Глобфел — это противовирусная сыворотка для кошек.

Глобфел-4 содержит гамма- и бета-глобулины, выделенные из сыворотки крови лошадей, гипериммунизированных штаммами вирусов, которые наиболее распространены среди кошек. При попадании в организм сыворотка формирует пассивный иммунитет на срок до 14 дней, после чего обычно производится вакцинация животного против указанных болезней.

Как применяют Глобфел

Препарат вводят подкожно, с соблюдениями условий стерильности. С профилактической целью кошкам массой менее 10 кг вводят 1 мл препарата, свыше 10 кг – 2 мл за один раз. С целью лечения препарат вводят с интервалом 12-24 часа в зависимости от тяжести состояния животного. Симптомы заболевания обычно не усугубляются, если инъекция была произведена на ранних сроках.

За 30-35 минут до введения препарата животному необходимо дать антигистаминный препарат, т.к. через 15 минут после инъекции у кошки могут возникнуть тяжелые симптомы аллергии. Аллергические реакции могут привести к отеку Квинке и другим тяжелым последствиям.

Кроме того, инъекцию не производят животным, подобранным с улицы, до тех пор, пока они в достаточной степени не окрепнут, и им не будем произведена дегельминтизация. Истощенные и ослабленные животные могут не перенести инъекцию Глобфела-4.

Рекомендуется назначение комплексной терапии, в которой Глобфел-4 будет сочетаться с витаминными препаратами, антибиотиками и пробиотиками. Нельзя смешивать препарат в одном шприце с другими лекарствами. Максимальная эффективность достигается при применении препарата в лечебных целях на ранних стадиях болезни.

Препарат Глобфел вводят кошкам подкожно, разовая доза — от 1 до 2 мл.

Особые указания

Препарат нельзя использовать по отношению к животным, у которых наблюдаются признаки истощения или имеются другие болезни, не входящие в круг воздействия сыворотки. Применение Глобфела-4 требует специальной подготовки животного и большого внимания со стороны ветеринара, т.к. препарат может вызвать сильные побочные эффекты.

Глобфел-4 необходимо хранить при температуре от 2°С до 8°С в сухом темном месте. Необходимо утилизировать все флаконы с истертой этикеткой, с содержимым нетипичного цвета, с истекшим сроком годности или повреждением целостности упаковки. Утилизация производится в соответствии с правилами, предусмотренными для биологически опасных веществ (необходимо производить кипячение в течение 15 мин).

Не предусмотрено применение сыворотки по отношению к беременным и кормящим кошкам. Персонал, производящий инъекцию, должен иметь достаточную квалификацию и иметь средства индивидуальной защиты – перчатки, маску, медицинский халат и шапочку во избежание контакта с препаратом.

Отзывы владельцев животных

Михаил, 23 года. Сделали укол Глобфела-4 за 2 недели до вакцинации кошки. До этого ветеринар дал таблетку от аллергии. Кошка после укола была вялая, но в целом претензий к препарату у меня нет, вакцинация в последующем прошла без проблем, и кошка вернулась к обычному состоянию.

Владельцы отмечают, что препарат не очень хорошо переносится кошками.

Раиса, 38 лет. Отвели к ветеринару уличную кошку, тот сделал укол Глобфела. Кошка очень страдала, ее сильно рвало, и она какое-то время даже не могла ходить. Пришлось в срочном порядке отвозить в другую клинику, где ее откачивали… От ветеринаров услышала, что это все из-за того, что укол был сделан без подготовки, чего допускать нельзя. В целом не могу рекомендовать, т.к. кошке после укола было очень плохо, и врачи говорят, что животные плохо переносят эту сыворотку.

Что можно привезти в приют для животных в г.Королеве?

Друзья, если вы хотите подарить приюту подарки, но не знаете что нужнее всего, то у нас приготовлен список-подсказка (который можно скачать):

Самый простой способ передать что-то в приют — передать через вет.клинику СоВет, по адресу: г. Королев, ул. Горького, 6a стр. 1. Время работы: ежедневно, с 9 до 21. Телефон вет.клиники: +7(967)206-01-59

Кошки:

— Всегда нужен сухой корм для стерилизованных кошек, Royal Canin urinary лечебный, Brit, Brit Care, Pro Plan, Sanabelle

— Влажный корм в паучах (Royal Canin, Brit, Pro Plan, Sanabelle) и паштеты для котят Royal Caninbaby cat

— Наполнитель древесный

Медикаменты:

Обычная аптека:

— Хлоргексидин

— Глистогонка: Мильбемакс и Милпразон, Стронхолд, Инспектор для кошек.

— Любые средства от блох.

Вакцина для кошек:

— Нобивак Трикат Трио

— Нобивак Рабиес

Помочь, оплатить лекарство, или лечение, можно по программе курирования или, обратившись в ветеринарную клинику «cоВЕТ» и через врача заказать сыворотки, вакцины, и другие необходимые лекарственные препараты.

Расходные материалы:

— Дез.средства для помещений Лайна

— Пакеты для мусора 30 л плотные

— Перчатки виниловые или нитриловые неопудренные

— Бумажные полотенца

— Ватные палочки и ватные диски

— Картонные когтеточки

— Игрушки: удочки, мячики, мышки

— Пеленки 40/60, 60/60, 60/90

Собаки:

— Сухой корм Royal Canin Recovery (рекавери) или консервы для ослабленных после операций животных любого производителя.

— Консервы обычные Brit, Вилли Хвост

— Консервы для ослабленных после операций животных любого производителя.

— Средства для обработки от клещей и блох в таблетках (Бравекто, Фронтлайн Нексгард, Симпарика и др.)

— Глистогонные препараты для и щенков

— Крупы гречка и рис, можно принести свежую мелконашинкованнюую капусту и морковку

— Картон, картонные коробки для настила

— Сено или опилки (особенно актуально в холодное время года)

— Брезентовые поводки 2/4/5м

— Ошейники от 40 см

— Игрушки ( тянучки, пищалки, мячики др.)

— Сушёные и вяленые лакомства

— Мясо и субпродукты

— переноски всех размеров, для любого размера животных, автогамаки

— железные контейнеры для хранения корма

Медикаменты:

Обычная аптека:

— Хлоргексидин

— Перекись водорода

— Энтеросгель или Полисорб

— Гептрал в ампулах

— Гамавит , Фоспренил

— Гискан-5 сыворотка для собак

— Глобфел-4 противовирусная сыворотка для собак

— Фронтлайн Нексгард

— Фитокальцевит

— Кальций фирмы exel

— Витамины 8 в 1

Вакцины для собак:

Помочь, оплатить лекарство, или лечение, можно по программе курирования или, обратившись в ветеринарную клинику «cоВЕТ» и через врача заказать сыворотки, вакцины, и другие необходимые лекарственные препараты.

Расходные материалы:

— Перчатки нитриловые

— Шприцы 2/3/5/10/20 мл, инсулиновые 1мл

— Пеленки любые одноразовые 90х90 и бо́льшего размера

— Бинты стерильные, нестерильные марлевые

— Бинты самофиксирующиеся

— Марлевые салфетки

— Дез.средства для помещений (Лайна или Алмадез)

ринотрахеит у кошек лечение схема

Ринотрахеит кошек болезнь респираторная, которую порождает вирус кошачьего герпеса. Попав в организм животного, частицы вируса размножаются и, тем самым, повреждают слизистые глаз и дыхательные пути – носовые пазухи воспаляются, горло краснеет и отекает.

У тех кошек, у которых иммунитет ослаблен или организм страдает теми или иными болезнями, то таким ринотрахеит опасен осложнениями. Если вирус крайне активен, то возможен вызвать омертвление тканей бронхов, пищевода и роговицы глаз.

К воспалению возьмёт и зацепится бактериальная инфекция – тогда возможная слепота. Начнёт разрушаться носовая кость или появится отёк лёгких – летальный исход.

Что бы ни довести питомца до такой крайности владельцу не мешает ознакомиться – что представляет собой ринотрахеит у кошек, каковы симптомы и как лечить. Но заниматься самолечением не надо – несите питомца к ветеринарному врачу.

Ринотрахеит у кошек распространяется легче легкого. Что бы питомец заразился и в контакте с больным быть не нужно. Вирус источается с мочой, слюной и со слезами может. Летает по воздуху, то здесь то там, осядет и на это владелец обувью наступил, возможно, частицы вируса на одежду «присели» — вот и занёс хозяин заразу в дом.

Вирус короткое время сохраняется в окружающей среде, но при подходящих температурных и влажностных условиях способен здравствовать не один день. Усатая нос на улицу не кажет, но не смотря ни на что будет в группе риска, поэтому делать ко времени прививку.

Источником инфекции окажутся заражённые хвостики. Переболели кисы ринотрахеитом кошек — 80% из числа заражённых пожизненные вирусоносители. Итак, больные и переболевшие животные – источники возбудителя инфекции. И таковыми будут до месяцев 9-ти после излечения. Дней 50 возможно обнаружить вирус в носике у усатой. А некто скрытый вирусоноситель.

Попали частицы вируса в дыхательные пути любимчика, а через сутки любимчик начинает выделять возбудителя болезни. Недели три болеет усатик, на радость хозяину выздоровел, но для других усатых опасен – могут другие заразиться. Опасность заражения других хвостиков 6-9 месяцев.

Ринотрахеит у кошек появляется через попадания вируса в слизистые органов дыхания, каковой возможен содержаться:

1. в выделениях из носика
2. в гнойных выделениях из глаз
3. в слюне
4. в воздухе
5. на предметах, одежде, обуви
6. в грудном молочке
7. в сперме и истечениях из половых органов
8. кровь
9. моча
10. кал

Почаще ринотрахеит кошки подхватывают из-за общения с вирусоносителем, пореже – через воздух или одежду владельца.

Тем или иным способом вирус ринотрахеита возможен пересесть с больной кошки на здоровое животное:

1. физическое соприкосновение с больным
2. воздушно-капельным путем при чихании и кашле — подышал инфицированным воздухом
3. предметы, к которым прикасался больной
4. использование одного лотка как здоровым, так и больным
5. здоровенький питомец и инфицированный покушали из одной миски
6. поигрались одними игрушками
7. внутриутробно от матери к приплоду

После того как кошка переболела ринотрахеитом, стала скрытым вирусоносителем. Начиная с третьей недели болезни, слизистые дыхательных путей начинают восстанавливаться. Это удаётся в результате выработке иммунитетом кошки защитных антител к вирусу ринотрахеита.

Повторно заразиться кошке ринотрахеитом возможно, а на это спровоцируют:

1. иммунитет, который ослабел из-за стрессовой нагрузки
2. лечение гормонами
3. заражение иными болезнями
4. лактация у кошек

Противовирусные вакцины, сыворотки, таблетки для кошек и собак. Антигельмитные препараты (препараты против глистов)

Корма, товары и аксессуары для домашних питомцев.
Аквариумы и аксессуары для рыбок.
Клетки для птиц.
Рыбки, Попугаи, Черепахи и многое другое!

Противовирусные вакцины, сыворотки, таблетки для кошек и собак.
Антигельмитные препараты (препараты против глистов) — сиропы, таблеки, сыворотки для кошек и собак.
Капли на холку против блох.

• 1

  Вакцина «Мультифен-4»

  
  противовирусная для кошек

  «Мультифел-4» вакцина против панлейкопении, ринотрахеита, калицивирусной инфекции и хламидиоза кошек

• 2

  Сыворотка «Гискан-5»

  
  (поливалентная для собак)

  Сыворотка поливалентная против чумы плотоядных, парвовирусного, коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций собак.

• 3

  Таблетки «Фебтал»

  
  для кошек и собак

  Фенбендазол, входящий в состав препарата, губительно действует на все стадии развития нематод и цестод, нарушая углеводный обмен и микротубулярную функцию гельминтов. «Фебтал» имеет приятный для кошек запах и вкус, в большинстве случаев кошки едят его с удовольствием.

• 4

  «Празицид — комплекс» для собак

  Празицид комплекс относится к комбинированным противопаразитарным лекарственным препаратам. Обладает широким спектром действия, активен в отношении личиночных и половозрелых фаз развития кишечных нематод и цестод, блох, вшей, власоедов, саркоптоидных, демодекозных и иксодовых клещей, паразитирующих у собак.

• 5

  Средство «Празицид» для котят

  «Празицид-комплекс» назначают котятам, начиная 2-месячного возраста, с целью лечения и профилактики кишечных нематодозов, цестодозов, энтомозов, отодектоза, саркоптоза, нотоэдроза и демодекоза.

• 6

  Глистогон «Чистотел»

  
  суспензия для кошек

  Серия препаратов «Чистотел» создана для самого широкого круга владельцев домашних
  животных, для которых доступность и эффективность имеет решающее значение при
  выборе препаратов. Вот уже много лет ЧИСТОТЕЛ приходит на помощь нашим питомцам,
  оставаясь надежным средством борьбы с непрошенными гостями — блохами, клещами
  и гельминтами. За это время он помог вылечиться нескольким миллионам собак и кошек.

• 7

  Сироп «Гельминтал»

  
  для кошек и собак

  Препараты Гельминтал — новое поколение антигельминтиков, обладающих повышенной эффективностью и безопасностью. Они успешно заменяют традиционные препараты, к которым выработана резистентность паразитов. Необходимый эффект достигается за счет уникальной комбинации действующих веществ: моксидектин + празиквантел.
  Препараты дают кошкам и собакам с лечебной и профилактической целью при кишечных нематодозах (токсокароз, токсаскаридоз, унцинариоз, анкилостомоз), цестодозах (тениидозы, дипилидиоз, эхинококкозы), а также в целях профилактики дирофиляриоза.

• 8

  Сироп «Гельминтал» для кошек

  Препараты «Гельминтал» — новое поколение антигельминтиков, обладающих повышенной эффективностью и безопасностью. Гельминтал сироп назначают с лечебной и профилактической целью при нематодозах (токсокароз, токсаскаридоз, унцинариоз, анкилостомоз, трихоцефалез), цестодозах (тениидозы, дипилидиоз, эхинококкоз, дифиллоботриоз, мезоцестоидоз) и ассоциативных нематодо-цестодозных инвазиях.

• 9

  Таблетки «Альбен»

  
  антигельминтные

  Антигельминтный препарат широкого спектра действия, содержащий в качестве действующего вещества альбендазол. Обладая овоцидным действием, снижает зараженность гельминтами пастбищ.

• 10

  Таблетки «Азинокс» от глистов

  
  для собак и кошек

  Антигельминтные таблетки для кошек и собак «Азинокс». Празиквантел, входящий в состав препарата, повышает проницаемость клеточных мембран гельминта, что приводит к нарушению нервно-мышечной иннервации, параличу и гибели паразита. «Азинокс» уничтожает все стадии развития ленточных гельминтов.

• 11

  Капли «Чистотел Био»

  
  от блох для кошек

  Лекарственный препарат Дана применяют для лечения кошек и котят при энтомозах (вши, блохи, власоеды), саркоптозе, нотоэдрозе, отодектозе, демодекозе, поражении иксодовыми клещами и защиты животных от нападения эктопаразитов.

• 12

  Капли «Чистотел Био Юниор» от блох

  
  для щенков и котят

  Средство «Чистотел Био Юниор» может применяться на щенках возрастом от двух месяцев. Действующими веществами в каплях являются Фипронил и Перметрин. Средство не приводит к побочным эффектам у собаки, вылизывающей щенков. Гарантирует защиту на 2 месяца.

• 13

  Капли «Чистотел Био» для собак

  
  средних пород

  Капли «Чистотел Био» — безопасный и эффективный репеллент на растительной основе.
  Отпугивают блох, вшей, власоедов, комаров, мух, слепней. Не содержат токсичных компонентов и подходят для склонных к аллергии, больных, выздоравливающих и беременных животных.

• 14

  Капли «Чистотел био» от блох

  
  для крупных собак

  Капли «Чистотел био» — безопасный и эффективный репеллент на растительной основе. Отпугивают блох, вшей, власоедов, комаров, мух, слепней. Не содержат токсичных компонентов и подходят для склонных к аллергии, больных, выздоравливающих и беременных животных.

• 15

  Капли «БлохНэт max» для собак

  
  в ассортименте

  «БлохНэт max» относится к группе комбинированных инсектоакарицидных лекарственных препаратов. Обладает выраженным инсектоакарицидным действием против всех фаз развития блох, вшей, власоедов, личинок и имаго иксодовых и саркоптоидных клещей, паразитирующих на собаках, а также репеллентным действием против кровососущих комаров.

• 16

  Капли «Диронет СПОТ-ОН»

  
  на холку для кошек (для собак)

  Используется для профилактики поражения кошек саркоптоидными клещами, а также профилактика и лечение цестодозов, нематодозов и энтомозов у кошек.

• 17

  Капли «Барс» на холку

  
  для собак

  Барс от блох для собак обеспечивает не только эффективное уничтожение уже присутствующих на шерсти питомца блох, но и профилактику заражения его новыми паразитами.

• 18

  Таблетки «Секс барьер»

  
  для кошек и сук

  Используются для контрацепции и предохранения от нежелательной беременности у кошек и сук.

• 19

  Капли «Секс барьер» для сук

  Используются для снижения полового возбуждения, прерывания нежелательной беременности у сук.

• 20

  Капли «Секс барьер»

  
  для котов

  Применяют для контроля поведения кота или кобеля в периоды половой охоты. Эффективен при регуляции половой активности, коррекции агрессивного и асоциального поведения у котов.

• 21

  Капли «Секс барьер»

  
  для кобелей

  Применяется с целью устранения полового возбуждения, агрессивности, повышенной возбудимости, а также при мечении территории.

• 22

  Таблетки «КонтрСекс»

  
  для кошек и сук

  Применяется для регуляции половой охоты (прерывания и задержки течки), предотвращения нежелательной беременности у кошек и сук.

• 23

  Таблетки «КонтрСекс»

  
  для котов и кобелей

  КонтрСекс Neo – это препарат, предназначенный для контроля поведения кота или кобеля в периоды половой охоты. Эффективен при регуляции половой активности, коррекции агрессивного и асоциального поведения у котов и кобелей. Имеет высокий уровень безопасности.

• 24

  Капли «Гестренол»

  
  для котов

  Препараты серии «Гестренол» относятся к группе оральных бигормональных контрацептивных препаратов для снижения полового возбуждения, коррекции агрессивного и требовательного поведения котов в период возрастающей активности половых гормонов.

• 25

  Контрацептив для кошек

  
  «ROlf Club Секс контроль»

  Применяется для регуляции половой охоты, предотвращения нежелательной беременности у кошек.

Вирусные респираторные заболевания кошек (часть 3)

4 ВИРУСНАЯ ЛЕЙКЕМИЯ КОШЕК

ЭТИОЛОГИЯ

— Возбудителем болезни является ретровирус С-типа из подсемейства онкорнавирусов.

— Три варианта вируса — А, В и С — выделяют серологическим и генетическим анализом. Только ВЛК-А специфичен для кошек.

ВЛК-В, который был найден у кошек, инфицированных ВЛК-А, является результатом рекомбинации вируса типа А и эндогенного ВЛК. ВЛК-С является крайне распространенным вариантом вируса, который также находят у кошек, инфицированных ВЛК-А. Штаммы ВЛК-С являются мутацией ВЛК-А.

Патогенез ВЛК-инфекции

— Главными воротами инфекции является пищеварительный тракт, хотя возможна и трансплацентарная передача инфекции.

— Вирус обнаруживают в слюне, моче, кале и молоке, поэтому тесные контакты и взаимное вылизывание имеют главное значение в распространении инфекции.

Репликация ВЛК происходит в носоглотке, особенно в миндалинах, из которых он распространяется в другие лимфоидные ткани, главным образом в костный мозг. Многие кошки дают иммунную реакцию, благодаря которой вирус элиминируется на этой стадии, хотя может оставаться в латентной форме в костном мозге.

Более интенсивная репликация вируса в костном мозге может давать начало виремии и распространению инфекции, особенно в лимфоидные ткани и эпителиальные клетки носоглотки, слюнные железы и верхние дыхательные пути с последующим выделением вируса и заражением других кошек. На этой стадии эффективный иммунный ответ может элиминировать активную инфекцию, давая начало временной виремии, которая продолжается от 2 дней до 8 недель.

Однако некоторые кошки не элиминируют вирус, у них развивается персистирующая инфекция. У этих животных проявляются клинические симптомы, и они становятся источником инфекции для других кошек.

Распространение и клинические проявления инфекции тесно связаны с возрастом, иммунитетом и заражающей дозой вируса.

— Восприимчивость котят к инфекции явно снижается с возрастом, и, таким образом, персистирующая инфекция развивается только у одного из пяти котят старше 16 недель.

— Вируснейтрализующие антитела, которые содержаться в молозиве, защищают котят в первые 4 недели жизни.

— Заражающая доза вируса зависит от окружающей обстановки.

— У кошек индивидуального содержания контакты с восприимчивыми и выделяющими вирус животными редки, поэтому заражающая доза будет мала. Хотя большинство кошек может заразиться, но персистирующая инфекция разовьется лишь у некоторых из них.

— В больших кошачьих сообществах степень контактов и риск последующего заражения очень высоки, в таких условиях у 30% котят может развиться персистирующая инфекция.

— Персистирующая инфекция у кошки-матери приводит к развитию персистирующей инфекции у всех котят данного помета.

Латентная инфекция

Более половины кошек, которые выздоровели после ВЛК-инфекции, носят латентную инфекцию в костном мозге. Выброс вируса при латентной инфекции слишком низок для определения или для заражения эпителиальных клеток, и в дальнейшем, латентно инфицированные кошки редко являются источником инфекции для других животных. Однако латентный вирус активирован к репликации кортикостероидами. Даже латентный вирус в конце концов элиминируется, но примерно 10% кошек остаются латентно инфицированными по крайней мере на три года.

КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ

ВЛК-инфекция, наверное, самая распространенная причина смерти молодых взрослых кошек.

Клиническое заболевание наблюдается у хронически инфицированных кошек, большинство из которых умирает в течение 4 лет после заражения этим вирусом. Клинические синдромы, вызываемые с ВЛК-инфекцией, связаны с поражением кроветворной системы. Инфекция костного мозга оказывает серьезное воздействие на развитие лимфоидных и миелоидных клеток, давая начало их пролиферации (неоплазии) или подавляя их рост, хотя первичный механизм патогенеза неизвестен. Также следует отметить, что ВЛК-инфекция часто бывает связана с нарушением воспроизводства.

Неоплазия

ВЛК-инфекция может вызывать неоплазию лимфоидной и миелоид-ной ткани, хотя наиболее распространенным злокачественным новообразованием кроветворной системы у кошек является лимфосаркома (90% всех опухолей кроветворных органов и около трети всех неоплазии у кошек). Большинство случаев возникновения лимфосаркомы у кошек связано с ВЛК-инфекцией.

Лимфосаркомы подразделяются на четыре основных вида.

Тимусная (передняя медиасгинальиая) лимфосаркома

— Встречается главным образом среди молодых кошек (в возрасте младше 3 лет).

— Т-клетки в тимусе +/- локальные лимфоузлы, редко в крови.

— Симптомы включают тахипноэ, диспноэ, регургитацию и потерю веса.

— Часто присутствие плеврального выпота (заглушенные сердечные шумы), содержащего неопластические клетки (цитология ас-пиратов).

— При пальпации — повышенное напряжение грудной клетки.

— Диагноз ставится по результатам рентгенографии, цитологического анализа плеврального выпота, биопсии опухоли, которые на 80% ВЛК-положительны.

Многоочаговая лимфосаркома

— Периферическая макроскопическая лимфоаденопатия и увеличенная селезенка.

— Часто легкая анемия.

— Средний возраст 4 года.

— Диагноз ставится на основании результатов биопсии, которые на 60% ВЛК-положительные.

Абдоминальная лимфосаркома

— Опухоли в брюшной полости (главным образом между двенадцатиперстной и ободочной кишками, реже желудком или прямой кишкой), иногда диффузные.

— Иногда бывают затронуты локальные лимфоузлы и почки.

— Анорексия, потеря веса, рвота при сильной непроходимости, иногда понос и чаще анемия. — Средний возраст 8 лет.

— Диагноз ставится на основании клинических симптомов, пальпации брюшной полости, рентгенографии, лапаротомии. Только 30% ВЛК-положительные.

Лимфоидная лейкемия

— Базируется в костном мозге и поражает кроветворную систему.

— В дальнейшем сдвиг лейкоцитарной формулы крови, анемия и часто тромбоцитопения (с точечными кровотечениями на коже и слизистой оболочке).

— Лихорадка, слабость, потеря аппетита.

— Часто увеличена селезенка, редко — лимфоузлы.

— Диагноз основан на исследовании крови (неопластические клетки в мазках), биопсии костного мозга/аспиратов, результаты ВЛК-положительны в 60% случаев.

Лимфосаркомы часто развиваются в почках, носу, глазах, ЦНС и коже.

ВЛК-серонегативная лимфосаркома

ВЛК-серонегативная лимфосаркома не связана с ВЛК, это может быть, например, первичная неоплазия или результат ВИК-инфекции у старых кошек. Однако ВЛК-серонегативные случаи возникновения лимфосаркомы более распространены в колониях кошек с энзоотической ВЛК-инфекцией. Возможно, это происходит потому, что кошки с хорошей иммунной реакцией элиминируют вирус, но только после трансформации части клеток.

Миелоидная лейкемия

Миелоидная лейкемия встречается редко. Могут быть затронуты гранулоциты и эритроциты. В первую очередь повреждается костный мозг с возможным вторичным повреждением печени, селезенки и лимфоузлов. Наблюдается прогрессирующая анемия, перемежающаяся лихорадка и потеря веса. Тромбоцитопения вызывает точечные кровотечения, а лейкопения — иммуносупрессию и развитие вторичных инфекций. Диагноз ставится по результатам биопсии и исследованию крови. Почти всегда они бывают ВЛК-положительные, но эозинофильная лейкемия обычно дает ВЛК-серонегативный результат.

Анемия

Анемия относительно распространена у кошек по сравнению с другими видами животных, а ВЛК-инфекция является, возможно, самой важной причиной этого заболевания. Анемия может быть первична либо является результатом лимфоидной или миелоидной лейкемии, затрагивающей процесс нормального кроветворения. Первичная аплазия эритроцитов вызывает быстрое развитие анемии. Гематокрит может падать ниже 10%, хотя количество лимфоцитов остается нормальным. В связи с тем, что анемия является неренегеративным заболеванием, эритроциты остаются нормоцитозны и нормохромны.

Легкая, а чаще средняя форма гемолитической анемии также распространена у кошек, инфицированных ВЛК.

Полная костная аплазия встречается редко. У пораженных кошек наблюдается сильная лейкопения и анемия с быстрой потерей веса, анорексией и лихорадкой. При вскрытии выясняется, что у этих кошек был геморрагический энтерит и геморрагичные мезентериальные лимфоузлы.

Иммуносупрессия

Механизм, лежащий в основе иммуносупрессии, вызванной ВЛК, сложен и мало изучен. Важен штамм вируса, также играет роль структура белка оболочки р15Е, который может подавлять лимфоцитарный рост in vitro. Иммунодефицитные кошки обычно восприимчивы ко вторичным инфекциям, а клинические симптомы, связанные с иммуносупрессией варьируют в широких пределах.

— Кошки с персистирующей ВЛК-инфекцией очень восприимчивы к вирусным, бактериальным и грибковым респираторным и кишечным инфекциям и энтеритам. Такие кошки обычно очень худы и хронически больны или лихорадят.

— Иммуносупрессия может быть связана с гингивитами и стоматитами, хотя у старых кошек этот синдром чаще всего связан с ВИК.

— Заражение Haemobartonella и анемия более вероятны у кошек, инфицированных ВЛК, чем у здоровых кошек.

— Возникновение клинического инфекционного перитонита более распространено в кошачьих колониях, зараженных ВЛК.

— Персистирующие абсцессы или затяжное выздоровление у молодых кошек объясняются иммуносупрессией, вызванной ВЛК.

— Также наблюдали связанные с ВЛК-инфекцией «панлейкопения-подобные» энтериты, хотя считается, что их вызывает неизвестная парвовирусная инфекция.

Нарушения репродуктивной функции

— ВЛК-инфекция является наиболее распространенной причиной возникновения репродуктивной недостаточности у кошек.

— Резорбция плода обычно происходит на 3-5-й неделе беременности, поэтому беременность может быть подтверждена пальпацией небольших плодных припухлостей.

— Резорбция плода сопровождается выделениями из вульвы.

— Пораженные кошки-матери обычно имеют нормальную предшествующую беременность.

— Механизм смерти плода неизвестен, но может вызывать воспаление плаценты и эндометрит.

— Если плод выжил, и котенок родился вовремя, то он обычно уже инфицирован и очень слаб: ВЛК является возможной причиной синдрома «увядания» котят.

ЛЕЧЕНИЕ

Лечение ВЛК-обусловленных анемий, иммуносупрессии и репродуктивной недостаточности включает только неспецифическую интенсивную терапию и имеет очень неблагоприятный прогноз.

Небольшие успехи отмечаются и при лечении как миелоидной, так и лимфатической лейкемии. При лечении тимусной и многоочаговой лимфосарком уровень ремиссии превышает 60%, хотя кошки с этими заболеваниями обычно инфицированы ВЛК и в дальнейшем у них развиваются другие ВЛК-обусловленные заболевания, и они являются источником инфекции для других кошек.

Применяются различные типы лечения, использующие комбинации цитотоксических препаратов и кортикостероидов. Однако, в связи с тем, что правильная дозировка и назначение этих лекарственных средств является ключевым моментом, а сама схема лечения очень сложна, перед назначением химиотерапии больную кошку необходимо показать специалистам.

ДИАГНОСТИКА

Несколько компаний выпускают иммуноферментный анализ и другие тестсистемы для проверки цельной крови, сыворотки, плазмы или слюны на присутствие ВЛК-антигенов. Наличие инфекции подтверждается выделением вируса или иммунофлюоресценцией. Если антиген присутствует в кровеносной системе, а вирус уже элиминирован из крови, то некоторые кошки дают положительную реакцию после анализа ЭЛАЙЗА, но от них не удается выделить вирус. Следует отметить, что ЭЛАЙЗА может давать ложноположительные результаты, если образцы сыворотки гемолизированы. Для определения статуса виремии (острая или хроническая) кошку необходимо вновь протестировать через 12 недель.

КОНТРОЛЬ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИНФЕКЦИИ

Проверка и удаление инфицированных кошек

Обычная проверка и последующее удаление всех ВЛК-инфицированных кошек помогает исключить распространение инфекции во многих кошачьих сообществах. Методика достаточно проста и относительно дешева.

— Проверять всех кошек, отделять ВЛК-положительных животных от ВЛК-отрицательных, не принимать новых кошек и дезинфицировать помещения и т.д.

— Перепроверка через 12 недель и изоляция ВЛК-положительных животных (усыпление или перемещение).

— Проверка всех кошек каждые 6-12 месяцев.

— Проверка и изоляция в течение 12 недель всех вновь поступивших животных.

Вакцинация

Применяется несколько синтетических и инактивированных вакцин. Опубликованные данные свидетельствуют, что при большинстве экспериментальных заражений вакцины показали себя достаточно безопасными и эффективными.

— Рекомендуется проводить вакцинацию кошек начиная с возраста 9 недель.

— Некоторые ветеринары рекомендуют проводить обычное тестирование на ВЛК-антигены перед вакцинацией, потому что вакцина не обладает лечебным эффектом. Однако имеет смысл взвесить необходимость этой проверки и риск прорыва иммунитета после вакцинации.

— Вакцинация не вызывает антигенемии и в дальнейшем не влияет на обычный ВЛК-анализ. Таким образом, нахождение у привитой кошки ВЛК-виремии или антигенемии не является результатом вакцинации, а говорит о присутствии естественной инфекции.

— В связи с тем, что вакцина неживая, иммунитет после вакцинации не пожизненный, поэтому рекомендуется ежегодная ревакцинация. В то время, как большинство кошек старше 5 лет уже встретились с естественной ВЛК-инфекцией и приобрели достаточный иммунитет, вопрос о ревакцинации старых кошек должен рассматриваться индивидуально.

— Хотя ВЛК-вакцинация широко применяется среди кошек домашнего содержания, но наибольшую пользу она может принести в питомниках разведения кошек, где ВЛК-инфекция обычно является потенциальной проблемой.

— В таких ситуациях вакцинация всех кошек и особенно маленьких котят помогает предотвращать и контролировать любые прорывы иммунитета без обычной проверки животных и риска какой-либо поствакцинальной инфекции.

— Как и большинство других вакцин, ВЛК-вакцина не может обеспечить 100%-защиту, она должна быть дополнением к обязательной схеме «проверка и удаление инфицированных кошек».

— Обязательно нужно помнить, что вакцинация не гарантирует того, что кошка будет свободна от ВЛК. В дальнейшем она может стать источником инфекции для других кошек.

ВИРУСНАЯ САРКОМА КОШЕК

Вирус саркомы кошек (ВСК) является результатом взаимодействия ВЛК с частью генома клетки-хозяина вируса. Это приводит к формированию рекомбинантного вируса, который имеет делеции, не позволяющие ему реплицироваться без помощи первоначального ВЛК, но он содержит клеточный онкоген и способен вызывать опухоли, главным образом в фибробластах.

Случаи заражения ВСК отмечались по всему миру, но достаточно редко. ВСК-опухоли наблюдались у кошек с персистирующей ВЛК-инфекцией. Только при экспериментальном заражении клетки опухоли содержали ВСК и ВЛК, но в естественных условиях при обычных контактах кошки с кошкой такой передачи инфекции не наблюдается. ВСК находят во всех клетках опухоли, но у пораженных кошек был выделен только естественный тип ВЛК.

Опухоли обычно проявляются в виде множественных язвенных или узловатых незаживающих поражений кожи, которые вновь образуются после хирургического удаления. Позже возникают метастазы во внутренних органах. Все пораженные кошки имеют ВЛК-антигены в крови. В противоположность спонтанной фибросаркоме, которая обычно наблюдается в виде единичных опухолей у старых кошек, большинство ВСК-обусловленных опухолей возникают у кошек в возрасте 1-7 лет.

Диагноз обычно основан на анамнезе, выделении ВЛК и гистологическом подтверждении фибросаркомы, хотя для уточнения диагноза требуется тщательное лабораторное исследование.

5 ВИРУСНЫЙ ИММУНОДЕФИЦИТ КОШЕК

ЭТИОЛОГИЯ

Вирус иммунодефицита кошек (ВИК) является лентивирусом из семейства ретровирусов. Структурно, биохимически и по своей нуклеотидной последовательности он родственен вирусу иммунодефицита неловка (ВИЧ), причины СПИДа у людей, а инфекция у кошек, обусловленная этим вирусом, по своим клиническим проявлениям также связана с развитием иммунодефицита. ВИК не инфицирует человеческие клетки, а многочисленные исследования показали, что у человека не наблюдается никакой инфекции, обусловленной ВИК.

ЭПИЗООТОЛОГИЯ

— ВИК был выявлен у домашних кошек по всему миру.

— ВИК был выделен у большинства кошек, имеющих положительную реакцию на антитела.

— Антитела к ВИК-подобным вирусам были выявлены у других представителей семейства кошачьих как в дикой природе, так и в зоопарках, хотя у других кошачьих выделено несколько штаммов этого вируса.

— Титры антител у домашних кошек варьируют в зависимости от возраста и образа жизни, от 20% у «ослабленных» кошек до 5% у здоровых.

— Эта инфекция чаще обнаруживается у котов, чем у кошек, и основной возраст заболевания — более 5 лет.

— ВИК-инфекция наиболее распространена у кошек уличного содержания, у диких кошек и в колониях с постоянно сменяющимися членами. Антитела присутствуют примерно у трети кошек, контактировавших с инфицированной кошкой.

Основным путем передачи инфекции считаются взаимные укусы. Высокая концентрация вируса отмечена в слюне, а передача инфекции при укусах подтверждена экспериментально. Также экспериментально продемонстрировано трансплацентарное заражение плода, хотя встречались отдельные случаи горизонтального распространения инфекции от матери к котятам через слюну и молоко.

— Теория о передаче инфекции посредством укусов соответствует эпизоотологии ВИК-инфекции: группу риска составляют взрослые коты свободного (уличного) содержания, либо находящиеся в нестабильных по составу кошачьих сообществах.

— Питомники разведения породистых кошек обычно более стабильны по составу, там меньше драк между животными и соответственно меньше инфекции.

КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ

Экспериментальная инокуляция котят ВИК и лимфоаденопатией иногда сопровождалась легкой лихорадкой, депрессией и лейкопенией, развившихся примерно через 4 недели. Эта лимфоаденопатия менее выражена у более взрослых кошек, но обычно отсутствует у кошек, инфицированных естественным путем. Лимфоаденопатия постепенно исчезала в течение нескольких недель или месяцев.

Затем инфицированные кошки оставались клинически здоровыми в течение нескольких лет, пока не проявлялись ВИК-обусловленные симптомы. Возможно, что многие кошки умирали от других причин еще до развития СПИД-подобного заболевания.

— Клиническое заболевание наблюдается главным образом в среднем возрасте или у старых кошек.

— Как СПИД у людей, ВИК-инфекция часто вызывает клинические симптомы, напрямую не связанные с ВИК. Обычно это вторичные инфекции, обусловленные микроорганизмами, которые у иммунокомпетентных кошек вызывают только легкое заболевание.

Клинический синдром, обусловленный ВИК-инфекцией, обычно проявляется в виде:

— Хронический стоматит и хронический гингивит.

— Хронические заболевания верхних дыхательных путей.

— Истощение.

— Лихорадка.

— Лимфоаденопатия.

— Анемия.

— Хронические кожные заболевания.

— Хронический понос.

— Неврологические симптомы.

— Считается, что неврологические заболевания вызывает прямая ВИК-инфекция ЦНС. ВИК-обусловленные неврологические заболевания проявляются в виде двигательных и сенсорных нарушений или поведенческих изменений, включая аномалии сна. Таким образом, клинические симптомы показывают, какая часть ЦНС поражена ВИК-инфекцией.

— Заболевания глаз нередки у ВИК-инфицированных кошек. При диагностике глазных болезней, связанных с ВИК-инфекцией, может потребоваться офтальмологическое обследование, причем эти болезни обычно не связаны с потерей зрения. Передний увеит и глаукома описаны у ВИК-инфицированных кошек. Считается, что идиопатический увеит, наблюдаемый у кошек старше 6 лет, может быть ВИК-обусловленным.

— Имеется несколько свидетельств о том, что ВИК-инфекция может быть связана с повышенным риском неоплазии.

— Клинические симптомы ВИК-инфекции часто связаны с вторичными инфекциями:

— Большинство ВИК-инфицированных кошек обычно имеют хронический стоматит и персистируюшую калицивирусную (КВК) инфекцию в носоглотке. Хотя неизвестно, играет ли КВК-инфекция главную роль в этих заболеваниях, или у иммуносупрессивных кошек происходит активация КВК.

— Кошки с хроническими заболеваниями верхних дыхательных путей часто инфицированы КВК или герпесвирусами. При поражении оральных и хронических респираторных заболеваниях и бактериальная инфекция играет значительную роль, поэтому назначение антибиотиков позволяет сильно уменьшить, но не исключить клинические симптомы. Тяжелая системная герпетическая инфекция также отмечалась у ВИК-инфицированных кошек.

— Тяжелые системные поксвирусные инфекции отмечали у ВИК-инфицированных кошек.

— Активный токсоплазмоз чаще обнаруживают у ВИК-инфицированных, чем у неинфицированных кошек, а ВИК-обусловленная иммуносупрессия может быть связана с клиническими проявлениями токсоплазмоза у кошек.

— Хронические кожные болезни у ВИК-инфицированных кошек могут быть связаны с паразитами, такими как клещи Notoedres, Cheyletiellaи Demodex, а также с различными грибковыми и бактериальными инфекциями.

— Другими оппортунистическими и вторичными инфекциями, связанными с ВИК, являются гемобартонеллез, кишечный кокцидиоз, кандидоз, аспергиллез, криптококкоз, псевдомонадные и микобактериальные инфекции.

— Инфекции, обусловленные ассоциацией ВИК и вируса лейкемии кошек (ВЛК), характеризуются с быстрым развитием иммунодефицита и клинического заболевания как в природе, так и в эксперименте. Однако одновременная ВИК и ВЛК-инфекция возникает редко, потому что кошки заражаются ВЛК в молодом возрасте, в то время как ВИК-инфекция более распространена среди более старших кошек.

— Не обнаружено связи между ВИК-инфекцией и присутствием коронавирусов или присутствием симптомов инфекционного перитонита у ВИК-инфицированных кошек.

ДИАГНОСТИКА

Определение титров антител

ВИК выделен у большинства кошек с выявленными титрами антител, поэтому определение титров антител является методом, наиболее часто используемым в диагностике ВИК-инфекции. Некоторые иммуно-концентрационные наборы и наборы ЭЛАЙЗА позволяют определять антитела, реагирующие с участком р24-антигена ВИК. Такие тесты особенно необходимы в практической лаборатории, особенно наборы, позволяющие производить одновременно исследование на ВИК-антитела и ВЛК-антигены в одном анализе.

Большинство анализов с помощью ЭЛАЙЗА часто дают ложноположительные результаты, поэтому большие диагностические лаборатории часто используют дополнительно иммунотесты для подтверждения диагноза. Часто используют иммуноблоты или Вестернблоты, но эти приемы достаточно сложны. Однако даже при использовании иммуноблотов возникают определенные трудности в интерпретации результатов пограничных реакций. Некоторые лаборатории используют флюоресцентный анализ, который также является достаточно специфичным. Наборы ЭЛАЙЗА для определения титров антител к вирусной оболочке антигена, также используются в некоторых лабораториях. Другие методики, такие как радиоиммунный анализ или реакция нейтрализации на вирусных частицах, чаще используются в исследовательских лабораториях, чем в диагностических.

Интерпретация ВИК-серологии

— Все серологические методы иногда могут давать явные ложноотрицательные результаты у ВИК-инфицированных кошек, а ЭЛАЙЗА иногда дает ложноположительные результаты.

— Хотя большинство кошек продуцирует антитела в течение нескольких недель после заражения ВИК, некоторые кошки могут оставаться серонегативными в течение года.

— В дальнейшем у некоторых серьезно больных кошек наблюдаются пониженные или неопределяемые титры антител, подобные явления иногда наблюдаются на последней стадии СПИДа у людей и могут быть результатом связывания всех антител вирусными антигенами или глубокой иммуносупрессией.

— Определение титров антител следует производить очень тщательно, имея в виду клиническое значение этого анализа.

— Определение титров антител у клинически здоровых кошек не имеет значения для прогноза заболевания, потому что, во-первых, инкубационный период может продолжаться несколько лет, и, во-вторых, некоторые кошки могут так и не проявить клинических симптомов заболевания. Многие исследователи считают, что у большинства кошек заболевание может прогрессировать до СПИД.

— Обнаружение у больной кошки вируса и антител к ВИК могут не иметь отношения к текущему заболеванию

Выделение вируса

Выделение вируса — достаточно дорогой и требующий затрат времени анализ, а так как большинство кошек с титрами антител одновременно и виремичны, то лабораторная диагностика инфекции в основном заключается в определении титров антител. Но иногда выделение вируса необходимо, особенно в случае свежеинфицированных кошек или кошек на терминальной стадии заболевания с неопределяемыми титрами антител.

У кошки берут один или несколько миллилитров крови, которые сразу помещают в культуры клеток или на транспортные среды. Лимфоциты и моноциты отделяют центрифугированием, а затем инкубируют в культурных средах с активатором митоза Т-клеток кошачьих, конкавалином А (конА) для стимуляции деления лимфоцитов. Через 2-3 дня клетки очищают и ресуспендируют в культурных средах, как было описано выше, но без конА, а с добавлением интерлейкина-2. Свежие, стимулированные, неинфицированные лимфоциты и среды добавляют каждые 10 дней, а культуру проверяют на наличие ВИК раз в неделю в течение 6 или более недель путем поиска цитопатических эффектов, электронной микроскопией, анализами на наличие обратной транскриптазы или продукции вирусных антигенов.

Другие методы, такие как полимеразная цепная реакция или тесты ЭЛАЙЗА на антигены, обычно используют в исследовательских лабораториях, а не в диагностических.

Другие лабораторные исследования

Другими лабораторными признаками подтверждения ВИК-обусловленных заболеваний являются:

— Персистирующая лейкопения, особенно лимфопения и нейтропения.

— Анемия.

— Гипергаммаглобулинемия.

Биопсия лимфоузлов может выявить фолликулярную дисплазию или атрофию и дегенерацию.

Подсчет циркулирующих клеток CD4 и соотношения CD4 / CD8 более перспективен для диагностики иммуносупрессии, хотя результаты даже этих методов трудно сопоставить с клиническими проявлениями иммунодефицита.

— Патогенез ВИК еще до конца не понят.

— Вирус выделяется из крови, лимфоидных органов, слюны и спи-номозговой жидкости и может расти in vitro в лимфоцитах, макрофагах и астроцитах.

— Некоторые штаммы ВИК могут расти на клеточных культурах других тканей, например, в монослое фибробластов.

— Кошек можно экспериментально инфицировать путем подкожной, внутримышечной, интраперитонеальной или внутривенной инъекции.

— После экспериментальной инокуляции котят высокой дозой ВИК вирус выделен из лимфоцитов через 1 неделю, а титры антител присутствуют уже через 3 недели, но развитие виремии и сероконверсия занимают намного больше времени, особенно при малых заразительных дозах вируса.

— Лимфаденопатия обычно наблюдается через 4-5 недель после экспериментального заражения, но ее тяжесть зависит от заразительной дозы и штамма вируса, а также от возраста кошки, которой была произведена инокуляция.

— Острая лимфаденопатия может сопровождаться легкой лихорадкой и лейкопенией, включая лимфопению и нейтропению.

— Лимфаденопатия обычно проходит через 2-3 месяца.

— После этого кошки остаются клинически здоровыми в течение нескольких лет. Тяжелые хронические заболевания, наблюдаемые в естественных условиях, невозможно полностью воспроизвести экспериментально. Считают, что асимптоматическое течение инфекции может длиться по крайней мере 3-5 лет.

— Еще не выяснен пусковой механизм начала терминальной стадии СПИД-подобных заболеваний у кошек.

Дефицит некоторых компонентов иммунного ответа проявляется в течение нескольких месяцев после инфицирования, а затем постепенно развиваются более серьезные иммунные нарушения.

— Снижение количества циркулирующих CD4-клеток и соотношения CD4/CDS.

— Снижение in vitro пролиферации в ответ на некоторые митогены и реакция in vivo на некоторые антигены, можно наблюдать первые 10 месяцев после заражения.

— ВИК в ряде случаев вызывает снижение экспрессии CD4-антигена и синцитиальных формаций в культурах CD4-клеток.

— Персистирующая инфекция вызывает прогрессирующее снижение экспрессии главного комплеса гистосовместимости (ГКГС) антигена типа II.

Теории о развитии СПИДа у кошек:

— СПИД-подобное заболевание развивается, когда количество функциональных СD4-клеток падает ниже критического уровня из-за нарастающих поражений.

— Нарушение развития СD4-клеток вызывает инфекция в макрофагах и других клетках, где присутствуют антигены.

— Вирус постоянно мутирует, чтобы избежать иммунного ответа организма кошки, а СПИД начинается, когда он полностью его преодолеет.

— ВИК-инфекция может вызывать аутоиммунные реакции против компонентов иммунной системы кошки.

— Вторичные инфекции могут манифестировать СПИД, вызывая легкую иммуносупрессию или же посредством стимуляции размножения лимфоцитов и активации макрофагов и, таким образом, усиливая реп-ликацию ВИК в этих клетках.

— Некоторые патогенные агенты, например, герпесвирус-1, могут прямо усиливать репликацию ВИК.

Считается, что неврологические проявления вызываются прямой репликацией ВИК в ЦНС.

ЛЕЧЕНИЕ

Лечение основано на профилактике вторичных инфекций и снижении тяжести клинических симптомов.

— Для контроля вторичных и сопутствующих бактериальных инфекций часто используют антибиотики.

— Хирургическое вмешательство может временно исключить хронические стоматит и гингивит у некоторых кошек.

— Кортикостероиды и мегэстрола ацетат могут временно смягчить клинические симптомы, но они малоэффективны.

Противовирусная терапия

Некоторые лекарства, разработанные для лечения ВИЧ, также подавляют ВИК в клеточных культурах, а для 9-(2-фосфонометоксиэтил)аденина (ФМЭА) и 3′-азидо-3’деокситимидина (АЗТ, зидовудин) показана некоторые клиническая эффективность у кошек. При экспериментальных исследованиях отмечено, что ФМЕА подавлял явную ВИК-инфекцию, если давался перед заражением, хотя как только лечение прекращалось, то развивалась виремия. Из подобных экспериментов явствует, что высокие дозы АЗТ замедляют, но не предотвращают развитие явной ВИК-инфекции. Некоторые исследователи считают, что в некоторых случаях ФМЕА и АЗТ могут способствовать полному клиническому выздоровлению в естественных условиях (но без элиминации вирусной инфекции). Исходя из нашего опыта лечения, использование АЗТ в основном разочаровывает, хотя несколько кошек показали временное клиническое улучшение в течение нескольких недель лечения. АЗТ может давать тяжелые побочные эффекты у кошек, включая анемию и нарушение работы печени, особенно при длительном назначении в высоких дозах.

ПРОФИЛАКТИКА И КОНТРОЛЬ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИНФЕКЦИИ

Вакцины против ВИК еще нет, поэтому основной контроль распространения инфекции заключается в исключении прямых контактов кошек.

— Для домашних кошек индивидуального содержания или для малых групп наилучшим, но не самым легким путем снижения риска заражения является исключение бродяжничества и драк.

— Нет свидетельств, что кастрация снижает риск заражения котов.

— Если известно, что новая кошка или уже живущие в доме кошки инфицированы ВИК, не стоит брать новое животное, если это может привести к дракам и повысить риск распространения инфекции.

— Однако в стабильных кошачьих сообществах, где драки случаются редко, риск заражения неинфицированных кошек от инфицированной очень мал.

— Не существует никаких причин убивать кошку только за то, что она инфицирована ВИК, но предотвращение бродяжничества будет моральным долгом ее владельца.

— Питомникам разведения породистых кошек необходимо избегать приема новых животных без серологического обследования и карантина.

— Если в колонии содержатся кошки серопозитивные к ВИК, лучше их отделить или вообще удалить из питомника. Хотя явная передача инфекции от кошки-матери к котятам случается очень редко, инфицированных кошек лучше исключить из размножения.

В питомниках для передержки или в кошачьих приютах, новые кошки должны содержаться в отдельных отсеках во избежание драк.

Инфекция не передается через предметы или пищевую посуду, а если выполняются все рекомендации по профилактике распространения респираторных заболеваний, то нет риска передачи ВИК-инфекции. Если в приютах бездомных животных кошки содержаться вместе, то новых животных необходимо содержать в карантине около 12 недель, а затем перед помещением их к другим ВИК-отрицательным кошкам необходимо проверить у них титры антител к ВИК.

6 ПОКСВИРУС (КОРОВЬЯ ОСПА) КОШЕК

Поксвирус является членом рода ортопоксвирусов (Ortopoxvirus) семейства Poxviridae (оспенных вирусов). Другими ортопоксвирусами являются малый поксвирус, ныне исчезнувший, вакцинный вирус (вакциния), вирус инфекционной эктромелии мышей, вирус оспы обезьян, вирус оспы верблюдов, поксвирус енотов и поксвирус калифорнийских полевок.

Все ортопоксвирусы близкородственны и очень похожи антигенно. Однако каждый из них отличается комбинацией биологических признаков, незначительными серологическими особенностями или структурой генома.

Не следует смешивать ортопоксвирусы с парапоксвирусами, такими как псевдопоксвирус (псевдооспа коров) и орфвирус. Хотя оба рода вирусов являются членами семейства Poxviridae, каждый из них имеет свою структурную морфологию и между ними не существует иммунной взаимосвязи.

ЭПИЗООТОЛОГИЯ

Поксвирус найден только в Евразии. Большинство сообщений о нахождении поксвируса где-либо еще в мире относится к вирусу вакцинии, который распространился после вакцинации людей и иногда выделяется в отдельный вид.

Поксвирус имеет очень широкий спектр хозяев, включая крупный рогатый скот, людей, домашних кошек и различных животных в зоопарках. Однако основным резервуаром инфекции являются дикие грызуны. Антитела к поксвирусу были найдены у диких полевок и .лесных мышей в Западной Европе, также вирус был выделен у грызунов в Восточной Европе и Евразии.

Поксвирус сравнительно редко вызывает коровью оспу (в отличие от псевдопоксвируса, который может вызывать энзоотическую инфекцию по всему миру). Поксвирус вызывает повреждения сосков и может быстро распространяться через доильное оборудование. Может происходить передача вируса от коровы к человеку, но большинство людей, заболевших оспой коров, не контактировали со скотом.

Наиболее широко распространенным хозяином поксвируса являются домашние кошки. В Великобритании причиной примерно половины заболеваний, обусловленных поксвирусом, являются контакты человека с инфицированными кошками.

— Возможно, что кошки заражаются во время охоты.

— Большинство пораженных кошек — взрослые животные из сельской местности, хозяева которых постоянно охотятся на мелких млекопитающих.

— Большинство случаев заболевания кошек оспой наблюдается осенью, возможно, потому что популяции мелких млекопитающих достигают в этот период своей максимальной численности, а отдельные особи становятся особенно активными, благодаря чему и становятся легкой добычей в этот период.

— Возможна передача от кошки к кошке, но этот вид контакта вызывает асимптоматическую инфекцию у заразившейся кошки.

В европейских зоопарках поксвирус также выделен и у других представителей семейства кошачьих — у гепардов, львов, пум, оцелотов и рысей, а также у окапи, слонов, носорогов и муравьедов.

КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ

— Чаще всего внимание ветеринара сначала привлекают обширные поражения кожи.

— При дальнейшем осмотре выясняется, что изначально кошка имела только один очаг поражения — на голове, шее или передних конечностях. Эти первичные нарушения варьируют по объему от массивных абсцессов или участков целлюлита до маленьких струпных папул и язвочек, похожих на укусы грызунов. Однако многие владельцы описывают первичное поражение кожи как маленькие кусаные раны.

— Вторичные, обширные кожные поражения развиваются в период от нескольких дней до нескольких недель (в среднем 10 дней) после появления первого заметного поражения. Вначале они проявляются в виде маленьких, хаотически расположенных, эритематозных узелков, которые через 3-5 дней развиваются в язвенные папулы диаметром больше 1 см. Затем они быстро покрываются струпьями.

— Эти папулы часто не вызывают зуда, но зуд может возникнуть при вторичной инфекции или после заживления.

— Струпья высыхают и отделяются через 2-3 недели. Затем на месте ран вырастают новые волосы, и кошка полностью выздоравливает через 6-8 недель.

— Примерно у одной из пяти кошек отмечают легкие выделения из носа, конъюнктивиты или кратковременный понос, у некоторых кошек может наблюдаться депрессия или анорексия.

— Более тяжелые и хронические системные симптомы или замедленное заживление кожных повреждений могут быть результатом вторичных бактериальных инфекций, особенно если инфицировано первичное поражение кожи или на фоне иммуносупрессии после лечения кортикостероидами; также задерживать полное выздоровление могут хронические болезни (хроническая почечная недостаточность) или инфекции вирусом лейкемии кошек или вирусом иммунодефицита кошек.

— Тяжелые системные симптомы, особенно пневмония и перенесенные иммуносупрессирующие заболевания влекут очень неблагоприятный прогноз, в таких случаях рекомендуется эутаназия.

Коровья оспа крупных кошек

— Коровья оспа у диких кошек протекает очень тяжело.

— У инфицированных гепардов часто развивается пневмония, и они могут умереть еще до появления поражений кожи.

— Высокая смертность от поксвирусной инфекции отмечается у львов, оцелотов и рысей.

ДИАГНОСТИКА

Клинические симптомы

Опытные ветеринары могут диагностировать оспу у кошек по одним клиническим симптомам. Дифференциальный диагноз проводят с абсцессом после укусов, неоплазиями, эозинофильной гранулемой и ми-лиарной экземой, хотя обширные кожные поражения при оспе очень характерны.

Исследование фиксированного биопсинного материала

Биоптат микроскопически проверяют на присутствие характерных эозинофильных интроцитоплазматических включений поксвирусов. Однако их не всегда легко найти, поэтому для уточнения иногда требуется иммуногистохимическая окраска мазков.

Выделение вируса

Вирус выделяют из сухих нефиксированных струпьев. Их можно посылать по почте без каких-либо транспортных сред. Электронная микроскопия позволяет быстро диагностировать три из четырех случаев, но выделение вируса — более чувствительная проба. Анализ может занять до 10 дней.

Сыворотка крови

Сыворотка может быть проверена на присутствие титров антител с использованием нескольких методов. Иммунофлюоресцентный (ИФ) анализ обычно используется из-за своей чувствительности и быстроты исполнения. В связи с тем, что поксвирус не вызывает у кошек энзоотического заболевания, определение титров антител с большой вероятностью говорит о присутствии инфекции. Однако, используя специфические моноклональные антитела, ИФ-анализ можно модифицировать для выявления только иммуноглобулинов класса IgM, доказывающих присутствие инфекции.

ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА

Для оспы не существует какого-либо специального лечения, поэтому применяются антибиотики широкого спектра для контроля вторичных и сопутствующих бактериальных инфекций. Большие поражения кожи необходимо промывать антисептиком, на животное нужно надеть защитный (елизаветинский) воротник во избежание расчесов.

Кортикостероиды не назначают, потому что они могут только ухудшить состояние.

Против оспы кошек нет вакцины, потому что это заболевание не считается настолько распространенным и тяжелым, чтобы ее разрабатывать.

Контроль заболеваемости вакцинным вирусом у крупных кошек

Вакциния плохо развивается у крупных кошек, и у гепардов при анализах не выявляют антител. Контроль за распространением инфекции в зоопарках осуществляют путем быстрой диагностики и изоляции пораженных животных.

ОХРАНА ЗДОРОВЬЯ ЛЮДЕЙ

— Кошки могут стать источником поксвирусной инфекции людей (более половины всех случаев).

— Инфекция у людей в большинстве случаев ограничивается единственными поражениями кожи на руках или лице, но может распространяться и на другие части тела, например, с рук на лицо.

— Обширная инфекция и тяжелое заболевание может развиться у людей с пониженным иммунным ответом и у тех, кто перенес кожное заболевание. Поксвирус у человека может вызывать и более тяжелое течение болезни с симптомами ОРЗ, для лечения которой требуется госпитализация.

— Иногда отмечаются смертельные случаи.

— Вакцинация осповакциной, даже недавняя, может не дать полной защиты против первичной поксвирусной инфекции, хотя может предотвратить развитие более тяжелого заболевания.

Заболевания людей оспой коров редки: в Великобритании наблюдается всего два или три случая в год. Исследователи считают, что при соблюдении правил гигиены передача заболевания от кошек к человеку маловероятна.

Ветеринары и люди, связанные с уходом за инфицированными кошками, должны носить резиновые перчатки и следить, чтобы инфицированный материал не попал в открытые раны или глаза. Маленькие дети и люди старшего возраста, перенесшие кожные заболевания, иммуносупрессивные и ослабленные должны избегать контактов с кошками, пока у тех остаются струпья.

Вирус очень устойчив и может сохраняться в сухой и холодной среде несколько месяцев и даже лет. Однако он очень чувствителен к большинству дезинфектантов, особенно к гипохлориту.

ГУБЧАТАЯ ЭНЦЕФАЛОПАТИЯ КОШЕК

ЭТИОЛОГИЯ

О патогенном агенте, вызывающем ГЭК, известно очень мало. Хотя о природе инфекционного агента, вызывающего губчатую энцефалопатию у других видов животных скрепи (почесуху) у овец, губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота, болезни Крейтцфельдта-Якоба и куру у людей) также известно не много.

Теоретически считается, что структура патогенного агента включает либо белок («прион»), либо комбинацию белков и нуклеиновых кислот («вирино»). Заразительность скрепи связана с белковыми фибриллами (почесуха, обусловленная фибриллами — ПОФ), в которых невозможно определить относящиеся к почесухе нуклеиновые кислоты. Патогенные агенты, вызывающие губчатую энцефалопатию, крайне устойчивы: они выживают при высокой температуре и ультрафиолетовом излучении, которое обычно разрушает нуклеиновые кислоты. Однако возможно, что белковый компонент каким-то образом способен защищать очень маленький нуклеотидный геном (возможно, РНК), а небольшие частицы защищенного клеточного РНК были найдены в ПОФ. В дополнение можно сказать, что не доказано никаких способных к репликации «жизненных форм», которые бы не содержали нуклеиновых кислот, поэтому очень трудно представить, как белок может передавать такие вариации специфических штаммов (штаммы могут быть типизированы по патогенности в испытаниях на лабораторных мышах), которые проявляют себя как полностью различные штаммы почесухи. С другой стороны, белковые фибриллы, связанные с губчатой энцефалопатией, кодированы генами и найдены в нормальных тканях, а сами фибриллы состоят из белка клеток хозяина (белка Р), который аномально изменяется (модифицированный белок Р) во время инфекции. Одни считают, что этот патогенный агент просто имеет аномальную структуру белка («приона»), который катализирует (кристаллизует?) аномальную структуру других белков, производимых в ЦНС и других тканях, таким образом оказывая влияние на репликацию.

ПАТОГЕНЕЗ

— Путь инфекции у кошек неизвестен, у других видов животных заражение происходит через проглатывание инфицированной пищи, трансплацентарным путем и посредством кожной инокуляции.

— У кошек наиболее вероятным путем распространения инфекции является оральный, при пропитывании пищи, которая является источником инфекции.

— У кошек также неизвестен ни тот отрезок времени, который проходит между заражением и развитием инфекции, ни в каких тканях, кроме ЦНС, может быть найден патогенный агент. Неизвестны пути передачи инфекции между кошками.

ЭПИЗООТОЛОГИЯ

ГЭК встречается достаточно редко и до сих пор наблюдалась только у кошек в Великобритании или вывезенных из нее. Большинство случаев (более 60) отмечено у домашних кошек, но встречались и заболевания ГЭК у других кошачьих (гепардов, оцелотов и пум) в зоопарках.

Ретроспективные исследования аутопсийных материалов ЦНС показали, что ГЭК относительно новое заболевание кошек. Первые случаи были отмечены в 1990 году, вскоре после вспышки ГЭ крупного рогатого скота.

Домашние кошки, заболевшие губчатой энцефалопатией, ели широкий спектр кормов и объедки со стола, поэтому точно определить источник инфекции чрезвычайно трудно. Некоторые могут считать, что ГЭК может вызывать патогенный агент губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота либо подобный ему.

За время написания этой книги не появилось новых данных о результативных попытках заразить кошек мясом коров, больных ГЭ. Однако последние эксперименты на мышах показали, что возбудитель ГЭ крупного рогатого скота отличается от известных штаммов скрепи, но ГЭ крупного рогатого скота и ГЭК неотличимы друг от Друга.

КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ

Атаксия и дискоординация. Гиперчувствительность. Гиперметрия. Сильное слюнотечение. Мышечный тремор. Поведенческие изменения.

ДИАГНОСТИКА

Диагноз можно поставить только после аутопсии.

Диагноз ставится на основе характерных результатов гистопатологического исследования головного мозга на вскрытии и наличия фибрилл в тканях ЦНС при электронной микроскопии, а также обнаружения белка Р при окраске с использованием иммунной метки.

ОХРАНА ЗДОРОВЬЯ ЛЮДЕЙ

Степень риска заражения человека при контактах с инфицированной кошкой неизвестна, так же как и идентичность патогенных агентов и их связь с причинами губчатой энцефалопатии у других видов животных. Даже если этот агент опасен для человека, то маловероятно, что живая кошка может быть источником инфекции для человека. Однако при вскрытии пораженных животных нужно соблюдать предельную осторожность.

В Великобритании губчатая энцефалопатия кошек является заболеванием, подлежащим обязательной регистрации.

<< вернуться к списку статей

Обзор противовирусных препаратов и других соединений, обладающих активностью против вируса герпеса кошек-1

Foscarnet (фосфоноформиат; Foscavir ^® ) имитирует анион-пирофосфат для селективного ингибирования пирофосфатсвязывающего сайта на сайтах вирусной поли не влияет на ДНК-полимеразы человека. [56] Фоскарнет вводят внутривенно для лечения цитомегаловирусного ретинита или кожно-слизистых инфекций, устойчивых к ацикловиру, у людей с ослабленным иммунитетом.[57] Однако фоскарнет имеет очень низкую биодоступность при пероральном приеме (8%) для кошек [57] и заметно более низкую активность in vitro против FHV-1 по сравнению с большинством других известных противовирусных препаратов; [25] его применение у кошек значительно ниже. не рекомендуется.

Бромвинилдезоксиуридин , [31, 58] адефовир , [59] PMEDAP (9- (2-фосфонилметоксиэтил) -2, 6-диаминопурин HP 6-диаминопурин), ((S) -9- (3-гидрокси-2-фосфонилметоксипропил) аденин) [31] имеют вариабельную эффективность in vitro против FHV-1 (см.).Насколько известно авторам, об их эффективности и безопасности при пероральном или местном применении кошкам не сообщалось.

Другие соединения, исследованные на активность против FHV-1

Лизин , возможно, является наиболее изученным и, возможно, одним из наиболее спорных из всех других соединений с доказанной или предполагаемой противовирусной эффективностью против FHV-1 у кошек. Как и в случае с противовирусными препаратами, первоначальный интерес возник после данных in vitro и клинических испытаний на людях.Считается, что противовирусный эффект лизина возникает из-за того, что аргинин является незаменимой аминокислотой для репликации FHV-1 [60] и HSV-1 [61, 62], и предполагается, что лизин препятствует доступности аргинина для этих вирусов или его использованию во время синтеза белка. Было высказано предположение, что это влияет на синтез белка вируса больше, чем хозяина, потому что вирусные белки имеют более высокое содержание аргинина и лизина, чем белки человека (и кошек); [63] однако недавний анализ показывает, что разница между кошачьими и FHV- Содержание 1 аминокислоты в белке минимально.[64] Заметно повышенные концентрации лизина в сочетании с заметно низкими концентрациями аргинина подавляют репликацию HSV-1 [61, 62] и FHV-1 [60] in vitro . Однако это не подтвердилось более физиологичными концентрациями аминокислот. [65] Данные in vivo у кошек также противоречивы. Пероральное введение 500 мг L-лизина каждые 12 часов за 6 часов до инокуляции FHV-1 было связано с менее тяжелым конъюнктивитом, но с таким же выделением вируса, как у кошек, получавших плацебо.[66] У кошек, латентно инфицированных экспериментальной инокуляцией, но без клинических признаков, пероральное введение 400 мг L-лизина один раз в день уменьшало выделение вируса по сравнению с кошками, получавшими плацебо. [67] Несмотря на значительное повышение концентрации лизина в плазме, ни в одном исследовании не наблюдалось изменений концентрации аргинина в плазме. У некоторых кошек были отмечены легкие обратимые желудочно-кишечные расстройства, потенциально связанные с введением лизина. [66] В единственном исследовании по оценке болюсного введения лизина у естественно инфицированных кошек 144 кошки из приюта получали лизина по 250 мг (котята) или 500 мг (взрослые кошки) один раз в день в течение всего периода пребывания в приюте; исходы сравнивали с контрольной группой, не получавшей лечения.Не было обнаружено значительного лечебного эффекта ни по одному параметру. [68]

Также оценивалась безопасность и эффективность пищевых добавок с лизином. Никаких побочных эффектов не наблюдалось у кошек, которых кормили рационом с добавлением до 8,6% (сухого вещества) лизина. [69] В двух последующих испытаниях эффективности кошек в среде, где FHV-1 был энзоотическим, давали диету с добавлением 5,1% лизина, в то время как контрольные кошки получали базальный рацион (приблизительно 1% лизина). [70, 71] В обоих исследованиях болезнь была более тяжелой. и выделение вируса было увеличено у кошек, получавших дополнительный рацион, по сравнению с кошками, получавшими основной рацион.Это может быть частично объяснено наблюдением, что кошки уменьшили потребление пищи (и, следовательно, лизина), что совпало с пиком заболевания и присутствием вирусов. [70]

Таким образом, среди этих исследований существует значительная вариативность, особенно в отношении методологии, исследуемой популяции, а также доз и метода введения лизина. Однако вместе взятые данные этих исследований показывают, что лизин безопасен при пероральном введении кошкам и, при условии, что он вводится в виде болюса, может уменьшить выделение вируса у латентно инфицированных кошек и клинические признаки у кошек, подвергшихся первичному воздействию вируса.Однако стресс от болюсного введения в приютах может свести на нет его эффекты, и данные не подтверждают наличие пищевых добавок. К сожалению, не было проведено клинических испытаний в группе, в которой обычно используется этот препарат, — принадлежащих клиенту кошек с рецидивирующим герпетическим заболеванием.

Интерфероны (IFN) — это цитокины с различными иммунологическими и противовирусными функциями, которые можно разделить на 4 группы (α, β, γ и ω) и многочисленные подтипы.Вирусная инфекция стимулирует клетки секретировать IFN во внеклеточное пространство, где они ограничивают распространение вируса на соседние клетки, не будучи вирулицидными. Эти знания следует использовать, чтобы установить разумные ожидания относительно того, насколько терапевтически эффективными могут быть интерфероны, и решить, у каких пациентов и на каких стадиях заболевания они могут быть наиболее эффективными.

Хотя IFNs, вероятно, играют важную физиологическую роль в борьбе с вирусными инфекциями, данные in vitro и клинические испытания дали противоречивые и в целом отрицательные результаты. Тесты in vitro с использованием 1 × 10 ⁵ — 5 × 10 ⁵ МЕ / мл рекомбинантного человеческого IFNα или кошачьего IFNω снижали титр FHV-1 и / или цитопатический эффект без наблюдаемой цитотоксичности по отношению к линии клеток роговицы кошек [72 ] или клетки CRFK [73], на которых был выращен вирус. При более высоких концентрациях эффект IFNω был сильнее, чем IFNα. [73] В другом исследовании in vitro была продемонстрирована заметная синергическая активность против FHV-1, когда 10-62,5 мкг / мл ацикловира были объединены с 10 или 100 МЕ / мл рекомбинантного IFNα человека.Комбинация не увеличивала цитотоксичность, но позволяла почти в восемь раз снизить дозу ацикловира, необходимую для достижения максимального ингибирования FHV-1. Хотя синергизм имел место при назначении IFNα до или после инфекции, предварительное лечение было более эффективным [74]. Эти данные подтверждаются исследованием с использованием модели HSV-1 на мышах, в котором одновременное пероральное введение ацикловира и рецидивирующий внутрибрюшинный человеческий IFNα было более эффективным, чем любое лечение по отдельности [75]. In vivo Исследование аналогов нуклеозидов в комбинации с IFN у кошек является обоснованным, прежде чем их использование может быть рекомендовано.

Насколько известно авторам, было проведено всего 2 экспериментальных исследования инокуляции. В первом случае 5 кошек с SPF предварительно обработали 10 000 МЕ рекомбинантного кошачьего IFNω OU каждые 12 часов и 2 000 МЕ вводили перорально каждые 24 часа в течение 2 дней до заражения вирусом; После инокуляции терапию IFN не продолжали. [76] Благоприятных эффектов не было. Во втором исследовании подкожное введение 10 ⁸ МЕ / кг IFNα дважды в день в течение двух дней подряд до инокуляции действительно привело к более низким совокупным клиническим показателям для обработанных кошек.[77] В клинических испытаниях есть сообщения о введении IFN 37 кошкам, находящимся в собственности клиентов [78] и 13 кошкам, проживающим в приютах [79], с отрицательными результатами на FeLV и FIV, 24 кошкам, проживающим в приютах, с отрицательными результатами на FeLV ± FIV, [80 ] и 16 кошек, проживающих в приютах, дали положительный результат на FeLV, FIV или и то, и другое. [81] Эти кошки были разного возраста и демонстрировали признаки острого [78] незарегистрированного [80, 81] или хронического невосприимчивого [79] спонтанно возникающего заболевания верхних дыхательных путей. Их лечили рекомбинантным человеческим IFNα в дозе 10000 Ед / кг подкожно один раз в день в течение 14 дней [79], три 5-дневных цикла подкожных инъекций один раз в день 1 миллион Ед / кг рекомбинантного кошачьего IFNω в дни 0, 14 и 60. , [81] 1 капля 1 миллион Ед / мл рекомбинантного кошачьего IFNω или человеческого IFNα OU два раза в день в течение 14 дней, [80] или 2.5 миллионов единиц рекомбинантного IFNω вводят подкожно один раз в день 0, а затем 0,5 миллиона единиц вводят каждые 8 ​​часов в течение 21 дня в каждую ноздрю и конъюнктивальный мешок (по 1 капле в каждой) и в полость рта (остальные). [78] Только 2 исследования были плацебо-контролируемыми; ни один из них не показал значительного лечебного эффекта. [78, 80] Взятые вместе, данные на сегодняшний день не являются убедительными доказательствами использования интерферона для лечения герпетической болезни у кошек.

Лямбда-каррагинан (λ-каррагинан) представляет собой экстракт морских водорослей, содержащий сульфатированные полисахариды с in vitro активностью против репликации FHV-1 при использовании до, но не после вирусной адсорбции.[82] In vivo безопасность и эффективность λ-каррагинана были изучены в плацебо-контролируемом замаскированном исследовании на вакцинированных кошках, впервые подвергшихся воздействию FHV-1 дикого типа. [82] Несмотря на хорошую переносимость, офтальмологическое применение 1 капли раствора λ-каррагинана 250 мкг / мл до и после заражения (n = 6 кошек) или только после заражения (n = 6 кошек) не уменьшало клинических признаков. Уменьшение выделения вируса было отмечено только на 21 день после инокуляции. Другие экстракты растений с противовирусной активностью прошли предварительную оценку in vitro , но о клинической безопасности или эффективности не сообщалось.[83]

Лефлуномид является иммунодепрессантом с некоторой противовирусной эффективностью против вирусов герпеса человека. [84] Исследования эффективности in vitro с FHV-1 выявили значительное и дозозависимое снижение количества бляшек и — только при более высоких концентрациях — вирусной нагрузки. Однако при более высоких концентрациях наблюдалась некоторая цитотоксичность. Электронная микроскопия показала нарушение вирусной оболочки и сборки внешней мембраны, что может указывать на механизм действия.[85] Клинические исследования отсутствуют.

Лактоферрин представляет собой железосвязывающий гликопротеин млекопитающих, обладающий антибактериальными, противогрибковыми, противопротозойными и противовирусными свойствами. Он вырабатывается эпителиальными клетками слизистой оболочки и присутствует в слезах и других жидкостях организма. Лактоферрин обладает мощной противовирусной эффективностью против репликации FHV-1 in vitro , по-видимому, за счет ингибирования адсорбции или проникновения вируса в клетку. [86] Требуются исследования, оценивающие клиническую значимость этих данных.

Малые интерферирующие РНК (миРНК) — короткие (около 20 нуклеотидов) двухцепочечные участки РНК, предназначенные для трансфекции клетки и подавления экспрессии определенных генов. Чтобы преодолеть кратковременный эффект трансфекции нативных миРНК, их можно включить в плазмиды и, таким образом, увеличить их продолжительность жизни, особенно в быстро делящихся клетках. Первоначальные исследования in vitro продемонстрировали противовирусную активность siRNAs, нацеленных только на гликопротеин D (gD) FHV-1 или на гены gD и ДНК-полимеразы вместе, но не только на ген ДНК-полимеразы.[87, 88] Однако внутриклеточная доставка этих агентов важна, но оказывается сложной. Были разработаны агенты, которые способствуют доставке миРНК в клетки роговицы in vitro , и они кажутся нетоксичными in vitro и не вызывают раздражения при местном нанесении на глаза нормальных кошек [89]. Однако до сих пор им не удалось доставить миРНК в клетки роговицы после местного применения in vivo , возможно, из-за быстрого удаления тестируемых веществ с поверхности глаза слезами.[89]

Пробиотики были исследованы в проспективном плацебо-контролируемом пилотном исследовании [90], в котором кошкам, экспериментально инфицированным FHV-1 для другого исследования [22], вводили пробиотик Enterococcus faecium , штамм SF68. . Это клиническое испытание не выявило значительного лечебного эффекта; однако у кошек в обеих группах были такие минимальные признаки заболевания, что эффект лечения мог быть пропущен.

Обзор противовирусных препаратов и других соединений с активностью против кошачьего герпесвируса-1

Foscarnet (фосфоноформиат; Foscavir ^® ) имитирует анион-пирофосфат для селективного ингибирования концентраций пирофосфат-связывающих полимераз на сайтах вирусной ДНК. не влияют на полимеразы ДНК человека.[56] Фоскарнет вводят внутривенно для лечения цитомегаловирусного ретинита или кожно-слизистых инфекций, устойчивых к ацикловиру, у людей с ослабленным иммунитетом. [57] Однако фоскарнет имеет очень низкую биодоступность при пероральном приеме (8%) для кошек [57] и заметно более низкую активность in vitro против FHV-1 по сравнению с большинством других известных противовирусных препаратов; [25] его использование у кошек не рекомендуется.

Бромвинилдезоксиуридин , [31, 58] адефовир , [59] PMEDAP (9- (2-фосфонилметоксиэтил) -2, 6-диаминопурин HP 6-диаминопурин), ((S) -9- (3-гидрокси-2-фосфонилметоксипропил) аденин) [31] имеют вариабельную эффективность in vitro против FHV-1 (см.).Насколько известно авторам, об их эффективности и безопасности при пероральном или местном применении кошкам не сообщалось.

Другие соединения, исследованные на активность против FHV-1

Лизин , возможно, является наиболее изученным и, возможно, одним из наиболее спорных из всех других соединений с доказанной или предполагаемой противовирусной эффективностью против FHV-1 у кошек. Как и в случае с противовирусными препаратами, первоначальный интерес возник после данных in vitro и клинических испытаний на людях.Считается, что противовирусный эффект лизина возникает из-за того, что аргинин является незаменимой аминокислотой для репликации FHV-1 [60] и HSV-1 [61, 62], и предполагается, что лизин препятствует доступности аргинина для этих вирусов или его использованию во время синтеза белка. Было высказано предположение, что это влияет на синтез белка вируса больше, чем хозяина, потому что вирусные белки имеют более высокое содержание аргинина и лизина, чем белки человека (и кошек); [63] однако недавний анализ показывает, что разница между кошачьими и FHV- Содержание 1 аминокислоты в белке минимально.[64] Заметно повышенные концентрации лизина в сочетании с заметно низкими концентрациями аргинина подавляют репликацию HSV-1 [61, 62] и FHV-1 [60] in vitro . Однако это не подтвердилось более физиологичными концентрациями аминокислот. [65] Данные in vivo у кошек также противоречивы. Пероральное введение 500 мг L-лизина каждые 12 часов за 6 часов до инокуляции FHV-1 было связано с менее тяжелым конъюнктивитом, но с таким же выделением вируса, как у кошек, получавших плацебо.[66] У кошек, латентно инфицированных экспериментальной инокуляцией, но без клинических признаков, пероральное введение 400 мг L-лизина один раз в день уменьшало выделение вируса по сравнению с кошками, получавшими плацебо. [67] Несмотря на значительное повышение концентрации лизина в плазме, ни в одном исследовании не наблюдалось изменений концентрации аргинина в плазме. У некоторых кошек были отмечены легкие обратимые желудочно-кишечные расстройства, потенциально связанные с введением лизина. [66] В единственном исследовании по оценке болюсного введения лизина у естественно инфицированных кошек 144 кошки из приюта получали лизина по 250 мг (котята) или 500 мг (взрослые кошки) один раз в день в течение всего периода пребывания в приюте; исходы сравнивали с контрольной группой, не получавшей лечения.Не было обнаружено значительного лечебного эффекта ни по одному параметру. [68]

Также оценивалась безопасность и эффективность пищевых добавок с лизином. Никаких побочных эффектов не наблюдалось у кошек, которых кормили рационом с добавлением до 8,6% (сухого вещества) лизина. [69] В двух последующих испытаниях эффективности кошек в среде, где FHV-1 был энзоотическим, давали диету с добавлением 5,1% лизина, в то время как контрольные кошки получали базальный рацион (приблизительно 1% лизина). [70, 71] В обоих исследованиях болезнь была более тяжелой. и выделение вируса было увеличено у кошек, получавших дополнительный рацион, по сравнению с кошками, получавшими основной рацион.Это может быть частично объяснено наблюдением, что кошки уменьшили потребление пищи (и, следовательно, лизина), что совпало с пиком заболевания и присутствием вирусов. [70]

Таким образом, среди этих исследований существует значительная вариативность, особенно в отношении методологии, исследуемой популяции, а также доз и метода введения лизина. Однако вместе взятые данные этих исследований показывают, что лизин безопасен при пероральном введении кошкам и, при условии, что он вводится в виде болюса, может уменьшить выделение вируса у латентно инфицированных кошек и клинические признаки у кошек, подвергшихся первичному воздействию вируса.Однако стресс от болюсного введения в приютах может свести на нет его эффекты, и данные не подтверждают наличие пищевых добавок. К сожалению, не было проведено клинических испытаний в группе, в которой обычно используется этот препарат, — принадлежащих клиенту кошек с рецидивирующим герпетическим заболеванием.

Интерфероны (IFN) — это цитокины с различными иммунологическими и противовирусными функциями, которые можно разделить на 4 группы (α, β, γ и ω) и многочисленные подтипы.Вирусная инфекция стимулирует клетки секретировать IFN во внеклеточное пространство, где они ограничивают распространение вируса на соседние клетки, не будучи вирулицидными. Эти знания следует использовать, чтобы установить разумные ожидания относительно того, насколько терапевтически эффективными могут быть интерфероны, и решить, у каких пациентов и на каких стадиях заболевания они могут быть наиболее эффективными.

Хотя IFNs, вероятно, играют важную физиологическую роль в борьбе с вирусными инфекциями, данные in vitro и клинические испытания дали противоречивые и в целом отрицательные результаты. Тесты in vitro с использованием 1 × 10 ⁵ — 5 × 10 ⁵ МЕ / мл рекомбинантного человеческого IFNα или кошачьего IFNω снижали титр FHV-1 и / или цитопатический эффект без наблюдаемой цитотоксичности по отношению к линии клеток роговицы кошек [72 ] или клетки CRFK [73], на которых был выращен вирус. При более высоких концентрациях эффект IFNω был сильнее, чем IFNα. [73] В другом исследовании in vitro была продемонстрирована заметная синергическая активность против FHV-1, когда 10-62,5 мкг / мл ацикловира были объединены с 10 или 100 МЕ / мл рекомбинантного IFNα человека.Комбинация не увеличивала цитотоксичность, но позволяла почти в восемь раз снизить дозу ацикловира, необходимую для достижения максимального ингибирования FHV-1. Хотя синергизм имел место при назначении IFNα до или после инфекции, предварительное лечение было более эффективным [74]. Эти данные подтверждаются исследованием с использованием модели HSV-1 на мышах, в котором одновременное пероральное введение ацикловира и рецидивирующий внутрибрюшинный человеческий IFNα было более эффективным, чем любое лечение по отдельности [75]. In vivo Исследование аналогов нуклеозидов в комбинации с IFN у кошек является обоснованным, прежде чем их использование может быть рекомендовано.

Насколько известно авторам, было проведено всего 2 экспериментальных исследования инокуляции. В первом случае 5 кошек с SPF предварительно обработали 10 000 МЕ рекомбинантного кошачьего IFNω OU каждые 12 часов и 2 000 МЕ вводили перорально каждые 24 часа в течение 2 дней до заражения вирусом; После инокуляции терапию IFN не продолжали. [76] Благоприятных эффектов не было. Во втором исследовании подкожное введение 10 ⁸ МЕ / кг IFNα дважды в день в течение двух дней подряд до инокуляции действительно привело к более низким совокупным клиническим показателям для обработанных кошек.[77] В клинических испытаниях есть сообщения о введении IFN 37 кошкам, находящимся в собственности клиентов [78] и 13 кошкам, проживающим в приютах [79], с отрицательными результатами на FeLV и FIV, 24 кошкам, проживающим в приютах, с отрицательными результатами на FeLV ± FIV, [80 ] и 16 кошек, проживающих в приютах, дали положительный результат на FeLV, FIV или и то, и другое. [81] Эти кошки были разного возраста и демонстрировали признаки острого [78] незарегистрированного [80, 81] или хронического невосприимчивого [79] спонтанно возникающего заболевания верхних дыхательных путей. Их лечили рекомбинантным человеческим IFNα в дозе 10000 Ед / кг подкожно один раз в день в течение 14 дней [79], три 5-дневных цикла подкожных инъекций один раз в день 1 миллион Ед / кг рекомбинантного кошачьего IFNω в дни 0, 14 и 60. , [81] 1 капля 1 миллион Ед / мл рекомбинантного кошачьего IFNω или человеческого IFNα OU два раза в день в течение 14 дней, [80] или 2.5 миллионов единиц рекомбинантного IFNω вводят подкожно один раз в день 0, а затем 0,5 миллиона единиц вводят каждые 8 ​​часов в течение 21 дня в каждую ноздрю и конъюнктивальный мешок (по 1 капле в каждой) и в полость рта (остальные). [78] Только 2 исследования были плацебо-контролируемыми; ни один из них не показал значительного лечебного эффекта. [78, 80] Взятые вместе, данные на сегодняшний день не являются убедительными доказательствами использования интерферона для лечения герпетической болезни у кошек.

Лямбда-каррагинан (λ-каррагинан) представляет собой экстракт морских водорослей, содержащий сульфатированные полисахариды с in vitro активностью против репликации FHV-1 при использовании до, но не после вирусной адсорбции.[82] In vivo безопасность и эффективность λ-каррагинана были изучены в плацебо-контролируемом замаскированном исследовании на вакцинированных кошках, впервые подвергшихся воздействию FHV-1 дикого типа. [82] Несмотря на хорошую переносимость, офтальмологическое применение 1 капли раствора λ-каррагинана 250 мкг / мл до и после заражения (n = 6 кошек) или только после заражения (n = 6 кошек) не уменьшало клинических признаков. Уменьшение выделения вируса было отмечено только на 21 день после инокуляции. Другие экстракты растений с противовирусной активностью прошли предварительную оценку in vitro , но о клинической безопасности или эффективности не сообщалось.[83]

Лефлуномид является иммунодепрессантом с некоторой противовирусной эффективностью против вирусов герпеса человека. [84] Исследования эффективности in vitro с FHV-1 выявили значительное и дозозависимое снижение количества бляшек и — только при более высоких концентрациях — вирусной нагрузки. Однако при более высоких концентрациях наблюдалась некоторая цитотоксичность. Электронная микроскопия показала нарушение вирусной оболочки и сборки внешней мембраны, что может указывать на механизм действия.[85] Клинические исследования отсутствуют.

Лактоферрин представляет собой железосвязывающий гликопротеин млекопитающих, обладающий антибактериальными, противогрибковыми, противопротозойными и противовирусными свойствами. Он вырабатывается эпителиальными клетками слизистой оболочки и присутствует в слезах и других жидкостях организма. Лактоферрин обладает мощной противовирусной эффективностью против репликации FHV-1 in vitro , по-видимому, за счет ингибирования адсорбции или проникновения вируса в клетку. [86] Требуются исследования, оценивающие клиническую значимость этих данных.

Малые интерферирующие РНК (миРНК) — короткие (около 20 нуклеотидов) двухцепочечные участки РНК, предназначенные для трансфекции клетки и подавления экспрессии определенных генов. Чтобы преодолеть кратковременный эффект трансфекции нативных миРНК, их можно включить в плазмиды и, таким образом, увеличить их продолжительность жизни, особенно в быстро делящихся клетках. Первоначальные исследования in vitro продемонстрировали противовирусную активность siRNAs, нацеленных только на гликопротеин D (gD) FHV-1 или на гены gD и ДНК-полимеразы вместе, но не только на ген ДНК-полимеразы.[87, 88] Однако внутриклеточная доставка этих агентов важна, но оказывается сложной. Были разработаны агенты, которые способствуют доставке миРНК в клетки роговицы in vitro , и они кажутся нетоксичными in vitro и не вызывают раздражения при местном нанесении на глаза нормальных кошек [89]. Однако до сих пор им не удалось доставить миРНК в клетки роговицы после местного применения in vivo , возможно, из-за быстрого удаления тестируемых веществ с поверхности глаза слезами.[89]

Пробиотики были исследованы в проспективном плацебо-контролируемом пилотном исследовании [90], в котором кошкам, экспериментально инфицированным FHV-1 для другого исследования [22], вводили пробиотик Enterococcus faecium , штамм SF68. . Это клиническое испытание не выявило значительного лечебного эффекта; однако у кошек в обеих группах были такие минимальные признаки заболевания, что эффект лечения мог быть пропущен.

Обзор противовирусных препаратов и других соединений с активностью против кошачьего герпесвируса-1

Foscarnet (фосфоноформиат; Foscavir ^® ) имитирует анион-пирофосфат для селективного ингибирования концентраций пирофосфат-связывающих полимераз на сайтах вирусной ДНК. не влияют на полимеразы ДНК человека.[56] Фоскарнет вводят внутривенно для лечения цитомегаловирусного ретинита или кожно-слизистых инфекций, устойчивых к ацикловиру, у людей с ослабленным иммунитетом. [57] Однако фоскарнет имеет очень низкую биодоступность при пероральном приеме (8%) для кошек [57] и заметно более низкую активность in vitro против FHV-1 по сравнению с большинством других известных противовирусных препаратов; [25] его использование у кошек не рекомендуется.

Бромвинилдезоксиуридин , [31, 58] адефовир , [59] PMEDAP (9- (2-фосфонилметоксиэтил) -2, 6-диаминопурин HP 6-диаминопурин), ((S) -9- (3-гидрокси-2-фосфонилметоксипропил) аденин) [31] имеют вариабельную эффективность in vitro против FHV-1 (см.).Насколько известно авторам, об их эффективности и безопасности при пероральном или местном применении кошкам не сообщалось.

Другие соединения, исследованные на активность против FHV-1

Лизин , возможно, является наиболее изученным и, возможно, одним из наиболее спорных из всех других соединений с доказанной или предполагаемой противовирусной эффективностью против FHV-1 у кошек. Как и в случае с противовирусными препаратами, первоначальный интерес возник после данных in vitro и клинических испытаний на людях.Считается, что противовирусный эффект лизина возникает из-за того, что аргинин является незаменимой аминокислотой для репликации FHV-1 [60] и HSV-1 [61, 62], и предполагается, что лизин препятствует доступности аргинина для этих вирусов или его использованию во время синтеза белка. Было высказано предположение, что это влияет на синтез белка вируса больше, чем хозяина, потому что вирусные белки имеют более высокое содержание аргинина и лизина, чем белки человека (и кошек); [63] однако недавний анализ показывает, что разница между кошачьими и FHV- Содержание 1 аминокислоты в белке минимально.[64] Заметно повышенные концентрации лизина в сочетании с заметно низкими концентрациями аргинина подавляют репликацию HSV-1 [61, 62] и FHV-1 [60] in vitro . Однако это не подтвердилось более физиологичными концентрациями аминокислот. [65] Данные in vivo у кошек также противоречивы. Пероральное введение 500 мг L-лизина каждые 12 часов за 6 часов до инокуляции FHV-1 было связано с менее тяжелым конъюнктивитом, но с таким же выделением вируса, как у кошек, получавших плацебо.[66] У кошек, латентно инфицированных экспериментальной инокуляцией, но без клинических признаков, пероральное введение 400 мг L-лизина один раз в день уменьшало выделение вируса по сравнению с кошками, получавшими плацебо. [67] Несмотря на значительное повышение концентрации лизина в плазме, ни в одном исследовании не наблюдалось изменений концентрации аргинина в плазме. У некоторых кошек были отмечены легкие обратимые желудочно-кишечные расстройства, потенциально связанные с введением лизина. [66] В единственном исследовании по оценке болюсного введения лизина у естественно инфицированных кошек 144 кошки из приюта получали лизина по 250 мг (котята) или 500 мг (взрослые кошки) один раз в день в течение всего периода пребывания в приюте; исходы сравнивали с контрольной группой, не получавшей лечения.Не было обнаружено значительного лечебного эффекта ни по одному параметру. [68]

Также оценивалась безопасность и эффективность пищевых добавок с лизином. Никаких побочных эффектов не наблюдалось у кошек, которых кормили рационом с добавлением до 8,6% (сухого вещества) лизина. [69] В двух последующих испытаниях эффективности кошек в среде, где FHV-1 был энзоотическим, давали диету с добавлением 5,1% лизина, в то время как контрольные кошки получали базальный рацион (приблизительно 1% лизина). [70, 71] В обоих исследованиях болезнь была более тяжелой. и выделение вируса было увеличено у кошек, получавших дополнительный рацион, по сравнению с кошками, получавшими основной рацион.Это может быть частично объяснено наблюдением, что кошки уменьшили потребление пищи (и, следовательно, лизина), что совпало с пиком заболевания и присутствием вирусов. [70]

Таким образом, среди этих исследований существует значительная вариативность, особенно в отношении методологии, исследуемой популяции, а также доз и метода введения лизина. Однако вместе взятые данные этих исследований показывают, что лизин безопасен при пероральном введении кошкам и, при условии, что он вводится в виде болюса, может уменьшить выделение вируса у латентно инфицированных кошек и клинические признаки у кошек, подвергшихся первичному воздействию вируса.Однако стресс от болюсного введения в приютах может свести на нет его эффекты, и данные не подтверждают наличие пищевых добавок. К сожалению, не было проведено клинических испытаний в группе, в которой обычно используется этот препарат, — принадлежащих клиенту кошек с рецидивирующим герпетическим заболеванием.

Интерфероны (IFN) — это цитокины с различными иммунологическими и противовирусными функциями, которые можно разделить на 4 группы (α, β, γ и ω) и многочисленные подтипы.Вирусная инфекция стимулирует клетки секретировать IFN во внеклеточное пространство, где они ограничивают распространение вируса на соседние клетки, не будучи вирулицидными. Эти знания следует использовать, чтобы установить разумные ожидания относительно того, насколько терапевтически эффективными могут быть интерфероны, и решить, у каких пациентов и на каких стадиях заболевания они могут быть наиболее эффективными.

Хотя IFNs, вероятно, играют важную физиологическую роль в борьбе с вирусными инфекциями, данные in vitro и клинические испытания дали противоречивые и в целом отрицательные результаты. Тесты in vitro с использованием 1 × 10 ⁵ — 5 × 10 ⁵ МЕ / мл рекомбинантного человеческого IFNα или кошачьего IFNω снижали титр FHV-1 и / или цитопатический эффект без наблюдаемой цитотоксичности по отношению к линии клеток роговицы кошек [72 ] или клетки CRFK [73], на которых был выращен вирус. При более высоких концентрациях эффект IFNω был сильнее, чем IFNα. [73] В другом исследовании in vitro была продемонстрирована заметная синергическая активность против FHV-1, когда 10-62,5 мкг / мл ацикловира были объединены с 10 или 100 МЕ / мл рекомбинантного IFNα человека.Комбинация не увеличивала цитотоксичность, но позволяла почти в восемь раз снизить дозу ацикловира, необходимую для достижения максимального ингибирования FHV-1. Хотя синергизм имел место при назначении IFNα до или после инфекции, предварительное лечение было более эффективным [74]. Эти данные подтверждаются исследованием с использованием модели HSV-1 на мышах, в котором одновременное пероральное введение ацикловира и рецидивирующий внутрибрюшинный человеческий IFNα было более эффективным, чем любое лечение по отдельности [75]. In vivo Исследование аналогов нуклеозидов в комбинации с IFN у кошек является обоснованным, прежде чем их использование может быть рекомендовано.

Насколько известно авторам, было проведено всего 2 экспериментальных исследования инокуляции. В первом случае 5 кошек с SPF предварительно обработали 10 000 МЕ рекомбинантного кошачьего IFNω OU каждые 12 часов и 2 000 МЕ вводили перорально каждые 24 часа в течение 2 дней до заражения вирусом; После инокуляции терапию IFN не продолжали. [76] Благоприятных эффектов не было. Во втором исследовании подкожное введение 10 ⁸ МЕ / кг IFNα дважды в день в течение двух дней подряд до инокуляции действительно привело к более низким совокупным клиническим показателям для обработанных кошек.[77] В клинических испытаниях есть сообщения о введении IFN 37 кошкам, находящимся в собственности клиентов [78] и 13 кошкам, проживающим в приютах [79], с отрицательными результатами на FeLV и FIV, 24 кошкам, проживающим в приютах, с отрицательными результатами на FeLV ± FIV, [80 ] и 16 кошек, проживающих в приютах, дали положительный результат на FeLV, FIV или и то, и другое. [81] Эти кошки были разного возраста и демонстрировали признаки острого [78] незарегистрированного [80, 81] или хронического невосприимчивого [79] спонтанно возникающего заболевания верхних дыхательных путей. Их лечили рекомбинантным человеческим IFNα в дозе 10000 Ед / кг подкожно один раз в день в течение 14 дней [79], три 5-дневных цикла подкожных инъекций один раз в день 1 миллион Ед / кг рекомбинантного кошачьего IFNω в дни 0, 14 и 60. , [81] 1 капля 1 миллион Ед / мл рекомбинантного кошачьего IFNω или человеческого IFNα OU два раза в день в течение 14 дней, [80] или 2.5 миллионов единиц рекомбинантного IFNω вводят подкожно один раз в день 0, а затем 0,5 миллиона единиц вводят каждые 8 ​​часов в течение 21 дня в каждую ноздрю и конъюнктивальный мешок (по 1 капле в каждой) и в полость рта (остальные). [78] Только 2 исследования были плацебо-контролируемыми; ни один из них не показал значительного лечебного эффекта. [78, 80] Взятые вместе, данные на сегодняшний день не являются убедительными доказательствами использования интерферона для лечения герпетической болезни у кошек.

Лямбда-каррагинан (λ-каррагинан) представляет собой экстракт морских водорослей, содержащий сульфатированные полисахариды с in vitro активностью против репликации FHV-1 при использовании до, но не после вирусной адсорбции.[82] In vivo безопасность и эффективность λ-каррагинана были изучены в плацебо-контролируемом замаскированном исследовании на вакцинированных кошках, впервые подвергшихся воздействию FHV-1 дикого типа. [82] Несмотря на хорошую переносимость, офтальмологическое применение 1 капли раствора λ-каррагинана 250 мкг / мл до и после заражения (n = 6 кошек) или только после заражения (n = 6 кошек) не уменьшало клинических признаков. Уменьшение выделения вируса было отмечено только на 21 день после инокуляции. Другие экстракты растений с противовирусной активностью прошли предварительную оценку in vitro , но о клинической безопасности или эффективности не сообщалось.[83]

Лефлуномид является иммунодепрессантом с некоторой противовирусной эффективностью против вирусов герпеса человека. [84] Исследования эффективности in vitro с FHV-1 выявили значительное и дозозависимое снижение количества бляшек и — только при более высоких концентрациях — вирусной нагрузки. Однако при более высоких концентрациях наблюдалась некоторая цитотоксичность. Электронная микроскопия показала нарушение вирусной оболочки и сборки внешней мембраны, что может указывать на механизм действия.[85] Клинические исследования отсутствуют.

Лактоферрин представляет собой железосвязывающий гликопротеин млекопитающих, обладающий антибактериальными, противогрибковыми, противопротозойными и противовирусными свойствами. Он вырабатывается эпителиальными клетками слизистой оболочки и присутствует в слезах и других жидкостях организма. Лактоферрин обладает мощной противовирусной эффективностью против репликации FHV-1 in vitro , по-видимому, за счет ингибирования адсорбции или проникновения вируса в клетку. [86] Требуются исследования, оценивающие клиническую значимость этих данных.

Малые интерферирующие РНК (миРНК) — короткие (около 20 нуклеотидов) двухцепочечные участки РНК, предназначенные для трансфекции клетки и подавления экспрессии определенных генов. Чтобы преодолеть кратковременный эффект трансфекции нативных миРНК, их можно включить в плазмиды и, таким образом, увеличить их продолжительность жизни, особенно в быстро делящихся клетках. Первоначальные исследования in vitro продемонстрировали противовирусную активность siRNAs, нацеленных только на гликопротеин D (gD) FHV-1 или на гены gD и ДНК-полимеразы вместе, но не только на ген ДНК-полимеразы.[87, 88] Однако внутриклеточная доставка этих агентов важна, но оказывается сложной. Были разработаны агенты, которые способствуют доставке миРНК в клетки роговицы in vitro , и они кажутся нетоксичными in vitro и не вызывают раздражения при местном нанесении на глаза нормальных кошек [89]. Однако до сих пор им не удалось доставить миРНК в клетки роговицы после местного применения in vivo , возможно, из-за быстрого удаления тестируемых веществ с поверхности глаза слезами.[89]

Пробиотики были исследованы в проспективном плацебо-контролируемом пилотном исследовании [90], в котором кошкам, экспериментально инфицированным FHV-1 для другого исследования [22], вводили пробиотик Enterococcus faecium , штамм SF68. . Это клиническое испытание не выявило значительного лечебного эффекта; однако у кошек в обеих группах были такие минимальные признаки заболевания, что эффект лечения мог быть пропущен.

Обзор противовирусных препаратов и других соединений с активностью против кошачьего герпесвируса-1

Foscarnet (фосфоноформиат; Foscavir ^® ) имитирует анион-пирофосфат для селективного ингибирования концентраций пирофосфат-связывающих полимераз на сайтах вирусной ДНК. не влияют на полимеразы ДНК человека.[56] Фоскарнет вводят внутривенно для лечения цитомегаловирусного ретинита или кожно-слизистых инфекций, устойчивых к ацикловиру, у людей с ослабленным иммунитетом. [57] Однако фоскарнет имеет очень низкую биодоступность при пероральном приеме (8%) для кошек [57] и заметно более низкую активность in vitro против FHV-1 по сравнению с большинством других известных противовирусных препаратов; [25] его использование у кошек не рекомендуется.

Бромвинилдезоксиуридин , [31, 58] адефовир , [59] PMEDAP (9- (2-фосфонилметоксиэтил) -2, 6-диаминопурин HP 6-диаминопурин), ((S) -9- (3-гидрокси-2-фосфонилметоксипропил) аденин) [31] имеют вариабельную эффективность in vitro против FHV-1 (см.).Насколько известно авторам, об их эффективности и безопасности при пероральном или местном применении кошкам не сообщалось.

Другие соединения, исследованные на активность против FHV-1

Лизин , возможно, является наиболее изученным и, возможно, одним из наиболее спорных из всех других соединений с доказанной или предполагаемой противовирусной эффективностью против FHV-1 у кошек. Как и в случае с противовирусными препаратами, первоначальный интерес возник после данных in vitro и клинических испытаний на людях.Считается, что противовирусный эффект лизина возникает из-за того, что аргинин является незаменимой аминокислотой для репликации FHV-1 [60] и HSV-1 [61, 62], и предполагается, что лизин препятствует доступности аргинина для этих вирусов или его использованию во время синтеза белка. Было высказано предположение, что это влияет на синтез белка вируса больше, чем хозяина, потому что вирусные белки имеют более высокое содержание аргинина и лизина, чем белки человека (и кошек); [63] однако недавний анализ показывает, что разница между кошачьими и FHV- Содержание 1 аминокислоты в белке минимально.[64] Заметно повышенные концентрации лизина в сочетании с заметно низкими концентрациями аргинина подавляют репликацию HSV-1 [61, 62] и FHV-1 [60] in vitro . Однако это не подтвердилось более физиологичными концентрациями аминокислот. [65] Данные in vivo у кошек также противоречивы. Пероральное введение 500 мг L-лизина каждые 12 часов за 6 часов до инокуляции FHV-1 было связано с менее тяжелым конъюнктивитом, но с таким же выделением вируса, как у кошек, получавших плацебо.[66] У кошек, латентно инфицированных экспериментальной инокуляцией, но без клинических признаков, пероральное введение 400 мг L-лизина один раз в день уменьшало выделение вируса по сравнению с кошками, получавшими плацебо. [67] Несмотря на значительное повышение концентрации лизина в плазме, ни в одном исследовании не наблюдалось изменений концентрации аргинина в плазме. У некоторых кошек были отмечены легкие обратимые желудочно-кишечные расстройства, потенциально связанные с введением лизина. [66] В единственном исследовании по оценке болюсного введения лизина у естественно инфицированных кошек 144 кошки из приюта получали лизина по 250 мг (котята) или 500 мг (взрослые кошки) один раз в день в течение всего периода пребывания в приюте; исходы сравнивали с контрольной группой, не получавшей лечения.Не было обнаружено значительного лечебного эффекта ни по одному параметру. [68]

Также оценивалась безопасность и эффективность пищевых добавок с лизином. Никаких побочных эффектов не наблюдалось у кошек, которых кормили рационом с добавлением до 8,6% (сухого вещества) лизина. [69] В двух последующих испытаниях эффективности кошек в среде, где FHV-1 был энзоотическим, давали диету с добавлением 5,1% лизина, в то время как контрольные кошки получали базальный рацион (приблизительно 1% лизина). [70, 71] В обоих исследованиях болезнь была более тяжелой. и выделение вируса было увеличено у кошек, получавших дополнительный рацион, по сравнению с кошками, получавшими основной рацион.Это может быть частично объяснено наблюдением, что кошки уменьшили потребление пищи (и, следовательно, лизина), что совпало с пиком заболевания и присутствием вирусов. [70]

Таким образом, среди этих исследований существует значительная вариативность, особенно в отношении методологии, исследуемой популяции, а также доз и метода введения лизина. Однако вместе взятые данные этих исследований показывают, что лизин безопасен при пероральном введении кошкам и, при условии, что он вводится в виде болюса, может уменьшить выделение вируса у латентно инфицированных кошек и клинические признаки у кошек, подвергшихся первичному воздействию вируса.Однако стресс от болюсного введения в приютах может свести на нет его эффекты, и данные не подтверждают наличие пищевых добавок. К сожалению, не было проведено клинических испытаний в группе, в которой обычно используется этот препарат, — принадлежащих клиенту кошек с рецидивирующим герпетическим заболеванием.

Интерфероны (IFN) — это цитокины с различными иммунологическими и противовирусными функциями, которые можно разделить на 4 группы (α, β, γ и ω) и многочисленные подтипы.Вирусная инфекция стимулирует клетки секретировать IFN во внеклеточное пространство, где они ограничивают распространение вируса на соседние клетки, не будучи вирулицидными. Эти знания следует использовать, чтобы установить разумные ожидания относительно того, насколько терапевтически эффективными могут быть интерфероны, и решить, у каких пациентов и на каких стадиях заболевания они могут быть наиболее эффективными.

Хотя IFNs, вероятно, играют важную физиологическую роль в борьбе с вирусными инфекциями, данные in vitro и клинические испытания дали противоречивые и в целом отрицательные результаты. Тесты in vitro с использованием 1 × 10 ⁵ — 5 × 10 ⁵ МЕ / мл рекомбинантного человеческого IFNα или кошачьего IFNω снижали титр FHV-1 и / или цитопатический эффект без наблюдаемой цитотоксичности по отношению к линии клеток роговицы кошек [72 ] или клетки CRFK [73], на которых был выращен вирус. При более высоких концентрациях эффект IFNω был сильнее, чем IFNα. [73] В другом исследовании in vitro была продемонстрирована заметная синергическая активность против FHV-1, когда 10-62,5 мкг / мл ацикловира были объединены с 10 или 100 МЕ / мл рекомбинантного IFNα человека.Комбинация не увеличивала цитотоксичность, но позволяла почти в восемь раз снизить дозу ацикловира, необходимую для достижения максимального ингибирования FHV-1. Хотя синергизм имел место при назначении IFNα до или после инфекции, предварительное лечение было более эффективным [74]. Эти данные подтверждаются исследованием с использованием модели HSV-1 на мышах, в котором одновременное пероральное введение ацикловира и рецидивирующий внутрибрюшинный человеческий IFNα было более эффективным, чем любое лечение по отдельности [75]. In vivo Исследование аналогов нуклеозидов в комбинации с IFN у кошек является обоснованным, прежде чем их использование может быть рекомендовано.

Насколько известно авторам, было проведено всего 2 экспериментальных исследования инокуляции. В первом случае 5 кошек с SPF предварительно обработали 10 000 МЕ рекомбинантного кошачьего IFNω OU каждые 12 часов и 2 000 МЕ вводили перорально каждые 24 часа в течение 2 дней до заражения вирусом; После инокуляции терапию IFN не продолжали. [76] Благоприятных эффектов не было. Во втором исследовании подкожное введение 10 ⁸ МЕ / кг IFNα дважды в день в течение двух дней подряд до инокуляции действительно привело к более низким совокупным клиническим показателям для обработанных кошек.[77] В клинических испытаниях есть сообщения о введении IFN 37 кошкам, находящимся в собственности клиентов [78] и 13 кошкам, проживающим в приютах [79], с отрицательными результатами на FeLV и FIV, 24 кошкам, проживающим в приютах, с отрицательными результатами на FeLV ± FIV, [80 ] и 16 кошек, проживающих в приютах, дали положительный результат на FeLV, FIV или и то, и другое. [81] Эти кошки были разного возраста и демонстрировали признаки острого [78] незарегистрированного [80, 81] или хронического невосприимчивого [79] спонтанно возникающего заболевания верхних дыхательных путей. Их лечили рекомбинантным человеческим IFNα в дозе 10000 Ед / кг подкожно один раз в день в течение 14 дней [79], три 5-дневных цикла подкожных инъекций один раз в день 1 миллион Ед / кг рекомбинантного кошачьего IFNω в дни 0, 14 и 60. , [81] 1 капля 1 миллион Ед / мл рекомбинантного кошачьего IFNω или человеческого IFNα OU два раза в день в течение 14 дней, [80] или 2.5 миллионов единиц рекомбинантного IFNω вводят подкожно один раз в день 0, а затем 0,5 миллиона единиц вводят каждые 8 ​​часов в течение 21 дня в каждую ноздрю и конъюнктивальный мешок (по 1 капле в каждой) и в полость рта (остальные). [78] Только 2 исследования были плацебо-контролируемыми; ни один из них не показал значительного лечебного эффекта. [78, 80] Взятые вместе, данные на сегодняшний день не являются убедительными доказательствами использования интерферона для лечения герпетической болезни у кошек.

Лямбда-каррагинан (λ-каррагинан) представляет собой экстракт морских водорослей, содержащий сульфатированные полисахариды с in vitro активностью против репликации FHV-1 при использовании до, но не после вирусной адсорбции.[82] In vivo безопасность и эффективность λ-каррагинана были изучены в плацебо-контролируемом замаскированном исследовании на вакцинированных кошках, впервые подвергшихся воздействию FHV-1 дикого типа. [82] Несмотря на хорошую переносимость, офтальмологическое применение 1 капли раствора λ-каррагинана 250 мкг / мл до и после заражения (n = 6 кошек) или только после заражения (n = 6 кошек) не уменьшало клинических признаков. Уменьшение выделения вируса было отмечено только на 21 день после инокуляции. Другие экстракты растений с противовирусной активностью прошли предварительную оценку in vitro , но о клинической безопасности или эффективности не сообщалось.[83]

Лефлуномид является иммунодепрессантом с некоторой противовирусной эффективностью против вирусов герпеса человека. [84] Исследования эффективности in vitro с FHV-1 выявили значительное и дозозависимое снижение количества бляшек и — только при более высоких концентрациях — вирусной нагрузки. Однако при более высоких концентрациях наблюдалась некоторая цитотоксичность. Электронная микроскопия показала нарушение вирусной оболочки и сборки внешней мембраны, что может указывать на механизм действия.[85] Клинические исследования отсутствуют.

Лактоферрин представляет собой железосвязывающий гликопротеин млекопитающих, обладающий антибактериальными, противогрибковыми, противопротозойными и противовирусными свойствами. Он вырабатывается эпителиальными клетками слизистой оболочки и присутствует в слезах и других жидкостях организма. Лактоферрин обладает мощной противовирусной эффективностью против репликации FHV-1 in vitro , по-видимому, за счет ингибирования адсорбции или проникновения вируса в клетку. [86] Требуются исследования, оценивающие клиническую значимость этих данных.

Малые интерферирующие РНК (миРНК) — короткие (около 20 нуклеотидов) двухцепочечные участки РНК, предназначенные для трансфекции клетки и подавления экспрессии определенных генов. Чтобы преодолеть кратковременный эффект трансфекции нативных миРНК, их можно включить в плазмиды и, таким образом, увеличить их продолжительность жизни, особенно в быстро делящихся клетках. Первоначальные исследования in vitro продемонстрировали противовирусную активность siRNAs, нацеленных только на гликопротеин D (gD) FHV-1 или на гены gD и ДНК-полимеразы вместе, но не только на ген ДНК-полимеразы.[87, 88] Однако внутриклеточная доставка этих агентов важна, но оказывается сложной. Были разработаны агенты, которые способствуют доставке миРНК в клетки роговицы in vitro , и они кажутся нетоксичными in vitro и не вызывают раздражения при местном нанесении на глаза нормальных кошек [89]. Однако до сих пор им не удалось доставить миРНК в клетки роговицы после местного применения in vivo , возможно, из-за быстрого удаления тестируемых веществ с поверхности глаза слезами.[89]

Пробиотики были исследованы в проспективном плацебо-контролируемом пилотном исследовании [90], в котором кошкам, экспериментально инфицированным FHV-1 для другого исследования [22], вводили пробиотик Enterococcus faecium , штамм SF68. . Это клиническое испытание не выявило значительного лечебного эффекта; однако у кошек в обеих группах были такие минимальные признаки заболевания, что эффект лечения мог быть пропущен.

Границы | Возможная противовирусная активность 5-аминолевулиновой кислоты при инфекции, вызванной вирусом инфекционного перитонита кошек (Feline Coronavirus)

Введение

Инфекционный перитонит кошек (FIP) — опасное для жизни инфекционное заболевание, вызываемое коронавирусом кошек (FCoV) у домашних и диких видов Felidae.FCoV широко распространен среди кошек во всем мире. FCoV представляет собой оболочечный однонитевой вирус с положительной смысловой РНК. Этот вирус принадлежит к роду Alphacoronavirus подсемейства Orthocoronavirinae семейства Coronaviridae (1). FCoV делится на два серотипа на основе аминокислотной последовательности белка spike (S), серотипа I FCoV и серотипа II FCoV (2). Серологические и генетические исследования показали, что FCoV типа I преобладает во всем мире (3–5). FCoV в основном передается фекально-оральным путем (6).Большинство кошек, инфицированных FCoV, имеют субклинический характер. Однако в S-белке произошло несколько мутаций, которые привели к развитию вирулентного типа, называемого вирусом инфекционного перитонита кошек (FIPV) (7, 8). Отличительными патологическими признаками FIP у кошек являются серозная жидкость в брюшной и плевральной полостях и пиогранулематозные поражения в некоторых органах (9).

FIP — это иммуноопосредованная вирусная инфекция, которую трудно лечить. Недавно было сообщено о нескольких эффективных противовирусных препаратах для лечения FIP (10, 11), но многие из них недоступны для практического использования.Некоторые препараты против FCoV, такие как итраконазол, доступны в больницах для животных, но их лечебный эффект ограничен (12). Поскольку FIP является хроническим и системным заболеванием, достичь клинической ремиссии сложно. Соответственно, желательно, чтобы терапевтические препараты от FIP имели следующие характеристики: (1) небольшое количество побочных эффектов для кошек, (2) низкая цена и (3) низкий мутагенез патогенов.

5-аминолевулиновая кислота (5-ALA) — это низкомолекулярная аминокислота, синтезируемая в клетках растений и животных (13, 14).Это промежуточный продукт в биосинтезе тетрапиррола. Поскольку 5-ALA хорошо растворима в воде и имеет низкую цитотоксичность, она широко применяется в медицине и сельском хозяйстве (15). Сообщалось о нескольких исследованиях воздействия 5-ALA на инфекционные заболевания. Судзуки и др. сообщили, что при пероральном введении 5-ALA и иона двухвалентного железа мышам, инфицированным малярией грызунов ( Plasmodium yoelii ), мыши выжили (16). С другой стороны, его влияние на вирусную инфекцию неясно.

В ветеринарии фотодинамическая терапия (ФДТ) с использованием 5-ALA была исследована для лечения опухолей у собак (17), но, насколько нам известно, влияние 5-ALA на инфекционные заболевания у животных не исследовалось.Мы исследовали, можно ли применять 5-ALA в качестве препарата против FCoV in vitro .

Материалы и методы

Культуры клеток, животных и вирусы

Клетки целого плода (fcwf) -4 плода Felis catus (любезно предоставленные доктором М.К. Хорзинеком из Утрехтского университета) выращивали в Eagles ‘MEM, содержащем 50% среды Лейбовица L-15, 5% фетальной телячьей сыворотки (FCS), 100 Ед / мл пенициллина и 100 мкг / мл стрептомицина. Поддерживающая среда имела тот же состав, что и среда для выращивания, за исключением концентрации FCS (2%).Для первичных макрофагов были выбраны первичные макрофаги кошек. Альвеолярные макрофаги кошек были получены от четырех кошек, свободных от специфических патогенов (SPF) в возрасте 3-5 лет, путем бронхоальвеолярного лаважа сбалансированным солевым раствором Хэнка. Первичные макрофаги кошек поддерживали в D-MEM с добавлением 10% FCS, 100 Ед / мл пенициллина и 100 мкг / мл стрептомицина. Кошек SPF содержали в изолированном помещении с контролируемой температурой. Эксперимент с использованием животных был одобрен президентом Университета Китасато решением Институционального комитета по уходу и использованию животных Университета Китасато (18-050) и проводился в соответствии с Руководством по экспериментам на животных Университета Китасато.Размеры выборки были определены на основе нашего предыдущего исследования, и было использовано минимальное количество кошек. Штамм FCoV KU-2 типа I (FIPV-I KU-2) был выделен в нашей лаборатории. FCoV-II 79-1146 любезно предоставлен доктором М. К. Хорзинеком из Утрехтского университета. Эти вирусы выращивали в клетках fcwf-4 при 37 ° C.

Соединения

5-ALA и цитрат железа (SFC) натрия были получены от Neopharma Japan (Токио, Япония). 5-ALA и SFC растворяли в поддерживающей среде в концентрации 200 и 50 мМ соответственно.Раствор SFC использовали в качестве растворителя 5 ALA. В день экспериментов эти соединения разбавляли до желаемых концентраций в поддерживающей среде.

Цитотоксическое действие соединений

Клетки fcwf-4 высевали на 96-луночные планшеты. Соединения добавляли в лунки в трех экземплярах. После инкубации в течение 96 часов супернатанты культур удаляли, добавляли раствор WST-8 (Kishida Chemical, Осака, Япония) и клетки возвращали в инкубатор на 1 час. Оптическую плотность образованного формазана измеряли при 450 нм с использованием 96-луночного спектрофотометрического планшета-ридера, как описано производителем.Процент жизнеспособности клеток рассчитывали по следующей формуле: Жизнеспособность клеток (%) = [(OD необработанных соединением клеток — обработанных соединением клеток) / (OD необработанных соединением клеток)] × 100. Концентрация цитотоксичности 50% (CC ₅₀ ) определяли как цитотоксическую концентрацию каждого соединения, которая снижала поглощение обработанных клеток до 50% по сравнению с поглощением необработанных клеток.

Противовирусные эффекты 5-ALA

Конфлюэнтных монослоев клеток fcwf-4 культивировали в среде с соединениями или без них в указанных концентрациях в 24-луночных многопланшетах при 37 ° C в течение 24 или 48 часов.Клетки промывали и вирус (MOI 0,01) адсорбировали в клетках при 37 ° C в течение 1 часа. После промывания клетки культивировали в 1,5% карбоксиметилцеллюлозе (CMC) -MEM или MEM с соединениями или без них. В случае клеток, культивированных в CMC-MEM, монослои клеток инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов, фиксировали и окрашивали 1% раствором кристаллического фиолетового, содержащим 10% забуференный формалин, а затем подсчитывали образовавшиеся бляшки. Процент уменьшения или увеличения бляшек рассчитывали по следующей формуле: Процент уменьшения бляшек (%) = [(количество бляшек в клетках, обработанных соединением) / (число бляшек в клетках, не обработанных соединением)] × 100.ЕС ₅₀ определяли как эффективную концентрацию соединений, которая снижала титр вируса в культуральном супернатанте инфицированных клеток до 50% по сравнению с титром вируса контроля. В случае клеток, культивируемых в MEM, культуральные супернатанты собирали через 48 часов после инфицирования и измеряли титры вирусов с помощью анализа TCID ₅₀ .

Первичные макрофаги кошек культивировали в среде с соединениями или без них в указанных концентрациях в 24-луночных многопланшетах при 37 ° C в течение 48 часов.После промывания PBS FIPV 79-1146 (1 × 10 ⁴ TCID ₅₀ ) позволяли адсорбироваться на клетках при 37 ° C с 5% CO ₂ в течение 1 часа. После промывки PBS клетки культивировали в среде и собирали супернатанты. Титры вирусов измеряли с помощью анализа TCID ₅₀ .

Статистический анализ

Данные только двух групп были проанализированы с использованием теста Стьюдента t ( t -теста Велча), а данные нескольких групп были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа с последующим тестом Тьюки.Значение P <0,05 считалось значимым.

Результаты

Цитотоксические и противовирусные эффекты 5-ALA

Анализ цитотоксичности был проведен для выяснения нетоксичной концентрации 5-ALA против клеток fcwf-4 (рис. 1). Более 75% клеток fcwf-4 выживали в присутствии 1000 мкМ 5-ALA (максимальная концентрация в этом эксперименте). Контрольный носитель не проявляет цитотоксического действия на клетки fcwf-4.

Рисунок 1 . Цитотоксические эффекты 5-ALA в клетках fcwf-4.Жизнеспособность клеток Fcwf-4 измеряли с помощью анализа WST-8. Черный круг: 5-АЛА. Белый круг: Автомобиль (SFC). Носитель (контроль растворителя) был таким же, как и в растворе 5-ALA при каждом серийном разведении. Результаты показаны как среднее значение ± стандартная ошибка. Данные представляют три независимых эксперимента ( n = 3).

Влияние 5-ALA на инфекцию FIPV в клеточной линии кошек

Противовирусные эффекты 5-ALA против FIPV оценивали с помощью анализа ингибирования бляшек в клетках fcwf-4. Клетки обрабатывали 5-ALA с помощью следующих трех процедур: 24-часовая предварительная обработка (до 24 часов), 24-часовая предварительная обработка с последующим 49-часовым совместным лечением с FIPV (до 24 часов и совместная обработка). 49 ч) и 48-часовой предварительной обработки с последующей 49-часовой совместной обработкой с FIPV (до 48 часов и со-49 часов).До 24 часов процент ингибирования бляшек значительно увеличивался при 500 мкМ или выше (рисунки 2A, B). В период до 24 часов и со-49 часов процент ингибирования бляшек значительно увеличивался при 125 мкМ или выше (Фигуры 2C, D). В период до 48 часов и со-49 часов процент ингибирования бляшек при FIPV типа I 125 мкМ 5-ALA достиг 75% (рисунки 2E, F). Контроль носителя, SFC, не оказывал ингибирующего действия на образование бляшек на FCoV ни при каких условиях. Согласно анализу титрования, продукция FIPV типа I и типа II была значительно снижена на 250 и 500 мкМ 5-ALA (рис. 3).

Рисунок 2 . Анализ ингибирования бляшек FIPV в клетках fcwf-4, обработанных 5-ALA. (A, B) Влияние 24-часовой предварительной обработки на противовирусную активность 5-ALA. Скорость ингибирования бляшек инфицированных FIPV клеток fcwf-4, предварительно обработанных 5-ALA в течение 24 часов. (C, D) Влияние 24-часовой предварительной обработки и 48-часовой последующей обработки на противовирусную активность 5-ALA. Скорость ингибирования бляшек инфицированных FIPV клеток fcwf-4, предварительно обработанных в течение 24 часов и после обработки в течение 48 часов 5-ALA. (E, F) Влияние 48-часовой предварительной обработки и 48-часовой последующей обработки на противовирусную активность 5-ALA. Скорость ингибирования бляшек инфицированных FIPV клеток fcwf-4, предварительно обработанных в течение 48 часов и после обработки в течение 48 часов 5-ALA. (A, C, E) тип I FIPV. (B, D, F) тип II FIPV. Черная полоса: 5-ALA. Белая полоса: носитель (контроль растворителя). Результаты показаны как среднее значение ± стандартная ошибка. Данные представляют четыре независимых эксперимента ( n = 4). ** p <0,01 (* p <0.05) по сравнению с автомобилем.

Рисунок 3 . Ингибирование инфекции FIPV 5-ALA в клетках fcwf-4. (A, C) Влияние 48-часовой предварительной обработки и 48-часовой последующей обработки на противовирусную активность 250 мкМ 5-ALA. (B, D) Влияние 48-часовой предварительной обработки и 48-часовой последующей обработки на противовирусную активность 500 мкМ 5-ALA. (A, B) 250 мкМ 5-ALA. (A, B) тип I FIPV. (C, D) тип II FIPV. Черный круг: 5-АЛА. Белый кружок: носитель (контроль растворителя).Результаты показаны как среднее значение ± стандартная ошибка. Данные представляют четыре независимых эксперимента ( n = 4). ** p <0,01 (* p <0,05) по сравнению с носителем.

Влияние 5-ALA на инфекцию FIPV в клеточной линии кошек

FIPV-инфицированных макрофагов вовлечены в прогрессирование симптомов FIP до тяжелого состояния. Мы исследовали, подавляет ли 5-ALA размножение FIPV в макрофагах. В этом эксперименте использовали тип II FIPV 79-1146 с высокой способностью к размножению в первичных макрофагах кошек.Продукция вируса в макрофагах, инфицированных FIPV, была снижена на 250 мкМ 5-ALA у трех из четырех кошек (рис. 4).

Рисунок 4 . Подавление инфекции FIPV в макрофагах. Влияние на противовирусную активность 5-ALA (250 мкМ) в первичных макрофагах кошек. Черная полоса: 5-ALA. Белая полоса: носитель (контроль растворителя). Данные представляют собой два независимых эксперимента ( n = 3).

Обсуждение

5-АЛК является промежуточным продуктом синтеза тетрапиррола у животных, растений и микроорганизмов (13–15).В 1980-х годах сообщалось о возможности эффективности 5-ALA в растениях (18), но было трудно произвести 5-ALA в количестве, достаточном для практического использования, поскольку микроорганизмы вырабатывают лишь небольшое количество. После того, как Nishikawa et al. разработали метод массового производства 5-ALA с использованием бактерий (19), эффективность 5-ALA была подтверждена не только в сельском хозяйстве, но также в медицинских и биологических областях. 5-АЛК недорога и практически используется в качестве добавки для улучшения продуктивности животных и иммунного ответа в области ветеринарии (14, 20).

5-ALA подавляла рост FIPV в клетках fcwf-4. Сообщалось, что комплексы металлов с метаболитом 5-ALA, протопорфирин IX (PpIX) обладают антивирусной активностью (21–23). Металлический комплекс PpIX, гем, подавляет размножение вируса денге (21). С другой стороны, гем не подавляет размножение вируса Зика (23). Неясно, подавляет ли гем размножение FCoV. Как правило, увеличение внутриклеточного гема стимулирует выработку гемеоксигеназы-1 (HO-1), фермента, разрушающего гем.Сообщалось, что HO-1 индуцирует противовирусную активность (24, 25). Однако в предварительном эксперименте мы подтвердили, что уровень экспрессии мРНК HO-1 не изменился в клетках, обработанных 250 мкМ 5-ALA (данные не показаны). Исходя из этого, 5-ALA-индуцированное ингибирование инфекции FIPV происходит за счет фактора, отличного от гема и HO-1.

В последнее время было проведено множество исследований терапевтических препаратов от FIP. Многие препараты, эффективные в отношении FIP in vitro , были идентифицированы, и было подтверждено, что некоторые из них проявляют лечебный эффект при введении кошкам с FIP (10–12).Однако в случаях с неврологическими проявлениями действие всех препаратов было слабым. Причиной этого считался плохой перенос этих препаратов в центральную нервную систему; Следовательно, необходимо лекарство, проявляющее противовирусное действие против FIPV, способное проникать в ткань мозга. 5-ALA — это низкомолекулярная аминокислота, которая может переноситься в ткани мозга (26). Кроме того, сообщалось, что диффузия 5-ALA из крови в нормальную ткань мозга очень низкая (27), что позволяет предположить, что она вызывает меньше побочных эффектов.FIP можно точно диагностировать только путем обнаружения антигена FCoV в очаге поражения (28). Однако, когда лечение начинается после постановки точного диагноза, симптомы прогрессируют, и во многих случаях состояние не поддается лечению. Следовательно, если доступен препарат, который можно вводить профилактически перед диагностикой FIP, можно предотвратить прогрессирование симптомов, для которого 5-ALA может быть идеальным средством. Однако в нашем эксперименте с использованием клеток-мишеней FIPV, макрофагов, противовирусные эффекты 5-ALA не наблюдались у некоторых кошек.Следовательно, когда 5-ALA используется в качестве терапевтического препарата для лечения FIP, препараты против FCoV, такие как GS-441524 (29), GC-376 (30), U18666A (31) и итраконазол (32), или анти- Одновременно следует использовать противовоспалительные препараты, такие как антитела против TNF-альфа (33).

В полевых условиях FECV в основном передается между кошками, тогда как горизонтальное инфицирование FIPV между кошками считается редким (34). Было высказано предположение, что FIPV возникает в результате генетической мутации FECV. Таким образом, если есть средства для предотвращения инфекции FECV на ежедневной основе, можно предотвратить развитие FIP.Вакцины, способной предотвратить инфекцию FECV, не разработано. Адди и др. сообщили, что экскреция гена вируса с фекалиями исчезла у кошек, инфицированных FECV, получавших синтетический аналог аденозина (35). Следовательно, ожидается удаление FECV, инфицированного кишечником, путем введения противовирусного препарата кошкам, инфицированным FECV. Однако синтетические аналоги аденозина могут вызывать мутацию гена коронавируса (36). Более того, даже несмотря на то, что уровень гена FECV в кале снизился ниже предела обнаружения у кошек, получавших синтетический аналог аденозина, FECV может латентно инфицировать кишечник или другие ткани.Чтобы предотвратить мутацию гена FECV и надежно искоренить инфекцию FECV, необходимо длительное введение синтетического аналога аденозина, но это нереально, поскольку это лекарство слишком дорогое. С другой стороны, 5-ALA практически используется в качестве добавки. 5-АЛК имеет низкую токсичность для животных и растений, что убедительно свидетельствует о возможности длительного введения 5-АЛК кошкам. Необходимо выяснить, применима ли 5-ALA в качестве добавки для предотвращения развития FIP у кошек, инфицированных FECV, в будущем.

В этом исследовании мы подтвердили возможность того, что 5-ALA ингибирует размножение FIPV и производство TNF-альфа. Поскольку 5-ALA — это аминокислота, присутствующая в организме, возможно ее немедленное введение. Однако необходимо вводить 5-ALA кошкам с FIP и наблюдать, можно ли получить терапевтический эффект. Кроме того, необходимо исследовать, устраняет ли длительное введение 5-ALA вирус и подавляет ли развитие FIP у кошек, инфицированных FECV.

Заявление о доступности данных

Оригинальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью / дополнительный материал, дальнейшие запросы можно направлять соответствующим авторам.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено президентом Университета Китасато по решению Институционального комитета по уходу и использованию животных Университета Китасато.

Взносы авторов

TT задумал и разработал исследование, проанализировал данные и написал рукопись. TT и KS собрали данные. TT, KS и TD собрали и обработали образцы. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Финансирование

Авторы заявляют, что это исследование получило финансирование от Neopharma Japan Co., Ltd. Финансирующая организация не участвовала в разработке, сборе, анализе, интерпретации данных исследования, написании этой статьи или решении представить ее для публикации.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Список литературы

2. Мотокава К., Хохдацу Т., Айзава С., Кояма Х., Хашимото Х. Молекулярное клонирование и определение последовательности гена пепломерного белка вируса инфекционного перитонита кошек типа I. Arch Virol . (1995) 140: 469–80. DOI: 10.1007 / BF01718424

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

3. Хохдацу Т., Окада С., Исидзука Й., Ямада Х., Кояма Х. Распространенность инфекций, вызванных коронавирусом кошек I и II типов, у кошек. Журнал ветеринарной медицины . (1992) 54: 557–62. DOI: 10.1292 / jvms.54.557

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

4. Куммроу М., Мели М.Л., Хессиг М., Генци Э., Польша А., Педерсен Н.С. и др.(2005). Серотипы 1 и 2 коронавируса кошек: распространенность серотипа и связь с заболеванием в Швейцарии. Clin Diagn Lab Immunol . 12: 1209–15. DOI: 10.1128 / CDLI.12.10.1209-1215.2005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

5. Ван Ю.Т., Чуэ Л.Л., Ван СН. 8-летнее эпидемиологическое исследование, основанное на экспрессируемых бакуловирусами тип-специфических белках-шипах для дифференциации инфекций, вызванных коронавирусом кошек I и II типа. BMC Vet Res . (2014) 10: 186.DOI: 10.1186 / s12917-014-0186-7

CrossRef Полный текст | Google Scholar

6. Педерсен NC. Обзор инфекций, вызванных кишечным коронавирусом кошек и инфекционным перитонитом. Кошачий Практик . (1995) 23: 7–21.

Google Scholar

7. Чанг Х.В., Эгберинк Х.Ф., Халпин Р., Спиро Диджей, Роттье П.Дж. Пептид слияния шипованного белка и вирулентность коронавируса кошек. Emerg Infect Dis . (2012) 18: 1089. DOI: 10.3201 / eid1807.120143

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

8.Licitra BN, Millet JK, Regan AD, Hamilton BS, Rinaldi VD, Duhamel GE и др. Мутация в сайте расщепления спайкового белка и патогенез коронавируса кошек. Emerg Infect Dis . (2013) 19: 1066. DOI: 10.3201 / eid1907.121094

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

10. Pedersen NC, Kim Y, Liu H, Galasiti Kankanamalage AC, Eckstrand C, Groutas WC, et al. Эффективность ингибитора 3C-подобной протеазы при лечении различных форм приобретенного инфекционного перитонита у кошек. J Feline Med Surg . (2018) 20: 378–92. DOI: 10.1177 / 1098612X17729626

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

11. Педерсен NC, Перрон М., Баннаш М., Монтгомери Э., Мураками Э., Лиепниекс М. и др. Эффективность и безопасность аналога нуклеозидов GS-441524 для лечения кошек с естественным инфекционным перитонитом кошек. J Feline Med Surg . (2019) 21: 271–81. DOI: 10.1177 / 1098612X19825701

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

12.Kameshima S, Kimura Y, Doki T, Takano T, Park CH, Itoh N. Клиническая эффективность комбинированной терапии итраконазолом и преднизолоном для лечения эффузивного инфекционного перитонита кошек. Журнал ветеринарной медицины . (2020) 82: 1492–6. DOI: 10.1292 / jvms.20-0049

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

14. Хендави А.О., Хаттаб М.С., Сугимура С., Сато К. Эффекты 5-аминолевулиновой кислоты в качестве добавки на продуктивность животных, статус железа и иммунный ответ сельскохозяйственных животных: обзор. Животные. (2020) 10: 1352. DOI: 10.3390 / ani10081352

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

15. Сасаки К., Ватанабе М., Танака Т., Танака Т. Биосинтез, биотехнологическое производство и применение 5-аминолевулиновой кислоты. Приложение Microbiol Biotechnol . (2002) 58: 23–9. DOI: 10.1007 / s00253-001-0858-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

16. Сузуки С., Хикосака К., Балогун Е.О., Комацуя К., Нийкура М., Кобаяши Ф. и др. In vivo лечебный и защитный потенциал перорально вводимой 5-аминолевулиновой кислоты плюс иона двухвалентного железа против малярии. Противомикробные агенты Chemother . (2015) 59: 6960–7. DOI: 10.1128 / AAC.01910-15

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

17. Осаки Т., Ёкоэ И., Огура С., Такахаши К., Мураками К., Иноуэ К. и др. Фотодинамическое обнаружение опухолей молочной железы собак после перорального приема 5-аминолевулиновой кислоты. Vet Comp Онкол .(2017) 15: 731–9. DOI: 10.1111 / vco.12213

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

18. Rebeiz CA, Montazer-Zouhoor A, Hopen HJ, Wu SM. Фотодинамические гербициды: 1. Понятие и феноменология. Enzyme Microb Technol . (1984) 6: 390–401. DOI: 10.1016 / 0141-0229 (84)

-7

CrossRef Полный текст | Google Scholar

19. Нисикава С., Ватанабе К., Танака Т., Миячи Н., Хотта Ю., Муроока Ю. Мутанты Rhodobacter sphaeroides, которые накапливают 5-аминолевулиновую кислоту в аэробных и темных условиях. J Biosci Bioeng . (1999) 87: 798–804. DOI: 10.1016 / S1389-1723 (99) 80156-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

20. Сасаки А., Иватани Н., Харада К. Эффект улучшения 5-аминолевулиновой кислоты на гиперлипидемию у миниатюрных собак шнауцера: открытое исследование в 5 случаях одной родословной. Йонаго Акта Мед . (2020) 63: 234–8. DOI: 10.33160 / yam.2020.08.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

21.Assunção-Miranda I, Cruz-Oliveira C, Neris RLS, Figueiredo CM, Pereira LPS, Rodrigues D, et al. Инактивация вирусов денге и желтой лихорадки гемом, кобальт-протопорфирин IX и олово-протопорфирин IX. J Приложение Microbiol . (2016) 120: 790–804. DOI: 10.1111 / jam.13038

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

22. Cruz-Oliveira C, Almeida AF, Freire JM, Caruso MB, Morando MA, Ferreira VN, et al. Механизмы инактивации вируса везикулярного стоматита протопорфирином IX, цинк-протопорфирином IX и мезопорфирином IX. Противомикробные агенты Chemother . (2017) 61: e00053–17. DOI: 10.1128 / AAC.00053-17

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

23. Нерис Р.Л., Фигейредо С.М., Хига Л.М., Араужо Д.Ф., Карвалью Калифорния, Версоза Б.Р. и др. Копротопорфирин IX и Sn-протопорфирин IX инактивируют вирусы Зика, Чикунгунья и другие арбовирусы, воздействуя на вирусную оболочку. Научная репутация . (2018) 8: 9805. DOI: 10.1038 / s41598-018-27855-7

CrossRef Полный текст | Google Scholar

25.Tseng CK, Lin CK, Wu YH, Chen YH, Chen WC, Young KC, et al. Гемоксигеназа 1 человека является потенциальным фактором клетки-хозяина против репликации вируса денге. Научная репутация . (2016) 6: 32176. DOI: 10.1038 / srep32176

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

26. Новотны А., Сян Дж., Штуммер В., Тойшер Н.С., Смит Д.Е., Кип РФ. Механизмы захвата 5-аминолевулиновой кислоты сосудистым сплетением. Дж. Нейрохим . (2000) 75: 321–8. DOI: 10.1046 / j.1471-4159.2000.0750321.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

27. Эннис С.Р., Новотны А., Сян Дж., Шакуи П., Масада Т., Штумер В. и др. Транспорт 5-аминолевулиновой кислоты между кровью и мозгом. Brain Res . (2003) 959: 226–34. DOI: 10.1016 / S0006-8993 (02) 03749-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

29. Мерфи Б.Г., Перрон М., Мураками Е., Бауэр К., Парк И., Экстранд С. и др. Аналог нуклеозидов GS-441524 сильно ингибирует вирус инфекционного перитонита кошек (FIP) в исследованиях культур тканей и экспериментальных кошачьих инфекциях. Ветеринарная микробиология . (2018) 219: 226–33. DOI: 10.1016 / j.vetmic.2018.04.026

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

30. Ким И, Лю Х., Галасити Канканамалаге А.С., Вирасекара С., Хуа Д.Х., Грутас В.С. и др. Обратное развитие смертельной коронавирусной инфекции у кошек с помощью ингибитора протеазы коронавируса широкого спектра действия. PLoS Pathog . (2016) 12: e1005531. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1005531

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

31.Takano T, Endoh M, Fukatsu H, Sakurada H, Doki T, Hohdatsu T. Ингибитор транспорта холестерина U18666A подавляет инфекцию коронавируса кошек I типа. Противовирусный Res . (2017) 145: 96–102. DOI: 10.1016 / j.antiviral.2017.07.022

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

33. Доки Т., Такано Т., Кавагое К., Кито А., Хохдацу Т. Терапевтический эффект кошачьих моноклональных антител против TNF-альфа при инфекционном перитоните кошек. Res Vet Sci .(2016) 104: 17–23. DOI: 10.1016 / j.rvsc.2015.11.005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

35. Адди Д.Д., Карран С., Беллини Ф., Кроу Б., Шихан Э., Украинчук Л. и др. Oral Mutian® X остановил распространение фекального коронавируса кошек от естественно инфицированных кошек. Res Vet Sci . (2020) 130: 222–9. DOI: 10.1016 / j.rvsc.2020.02.012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Противовирусное действие хлорида меди на калицивирус кошек и синергизм с рибавирином in vitro | BMC Veterinary Research

1.

Clarke IN, Lambden PR. Молекулярная биология калицивирусов. J Gen Virol. 1997. 78 (Pt 2): 291–301.

CAS Статья Google ученый

2.

Ди Мартино Б., Ди Рокко С., Сечи С., Марсилио Ф. Характеристика штамма калицивируса кошек, выделенного из образца фекалий собаки. Vet Microbiol. 2009. 139 (1–2): 52–7.

Артикул Google ученый

3.

Martella V, Pratelli A, Gentile M, Buonavoglia D, Decaro N, Fiorente P, Buonavoglia C.Анализ гена капсидного белка калицивируса кошачьего типа, выделенного от собаки. Vet Microbiol. 2002. 85 (4): 315–22.

CAS Статья Google ученый

4.

Баттилани М., Ваккари Ф., Карелль М.С., Моранди Ф., Бенацци С., Кипар А., Донди Ф., Скальярини А. Вирулентная калицивирусная болезнь кошек в приюте в Италии: описание случая. Res Vet Sci. 2013; 95 (1): 283–90.

Артикул Google ученый

5.

августа JR. Преданность. В: Консультации по внутренней медицине кошек (пятое издание). Сент-Луис: W.B. Сондерс; 2006. v.

Google ученый

6.

Sykes JE. Заболевание верхних дыхательных путей у кошек у детей. Ветеринарная клиника North Am Small Anim Pract. 2014; 44 (2): 331–42.

Артикул Google ученый

7.

Херли К.Ф., Сайкс Дж. Э. Новости о калицивирусе кошек: новые тенденции.Ветеринарная клиника North Am Small Anim Pract. 2003. 33 (4): 759–72.

Артикул Google ученый

8.

Cohn LA. Комплекс респираторных заболеваний кошек. Ветеринарная клиника North Am Small Anim Pract. 2011. 41 (6): 1273–89.

Артикул Google ученый

9.

Вилли Б., Спири А.М., Мели М.Л., Самман А., Хоффманн К., Сидлер Т., Каттори В., Граф Ф., Дисеренс К.А., Падрутт И. и др. Молекулярная характеристика и паттерны вирусной нейтрализации тяжелых, неэпизоотических форм калицивирусных инфекций кошек, напоминающих вирулентные системные заболевания кошек в Швейцарии и Лихтенштейне.Vet Microbiol. 2016; 182: 202–12.

CAS Статья Google ученый

10.

Койн К.П., Гаскелл Р.М., Доусон С., Портер С.Дж., Рэдфорд А.Д. Эволюционные механизмы персистенции и диверсификации калицивируса в эндемически инфицированных популяциях естественных хозяев. J Virol. 2007. 81 (4): 1961–71.

CAS Статья Google ученый

11.

Radford AD, Coyne KP, Dawson S, Porter CJ, Gaskell RM.Калицивирус кошек. Vet Res. 2007. 38 (2): 319–35.

CAS Статья Google ученый

12.

Smith AW, Iversen PL, O’Hanley PD, Skilling DE, Christensen JR, Weaver SS, Longley K, Stone MA, Poet SE, Matson DO. Антивирусное лечение для борьбы с тяжелыми и смертельными вспышками калицивирусной инфекции кошек. Am J Vet Res. 2008. 69 (1): 23–32.

CAS Статья Google ученый

13.

Wu H, Zhang X, Liu C, Liu D, Liu J, Tian J, Qu L. Противовирусное действие хлорида лития на калицивирус кошек in vitro. Arch Virol. 2015; 160 (12): 2935–43.

CAS Статья Google ученый

14.

Wu H, Liu Y, Zu S, Sun X, Liu C, Liu D, Zhang X, Tian J, Qu L. Противовирусный эффект гермакрона in vitro на калицивирус кошек. Arch Virol. 2016. 161 (6): 1559–67.

CAS Статья Google ученый

15.

McDonagh P, Sheehy PA, Fawcett A, Norris JM. Противовирусное действие мефлохина на калицивирус кошек in vitro. Vet Microbiol. 2015; 176 (3–4): 370–7.

CAS Статья Google ученый

16.

Дебски Б. Дополнение рациона свиней цинком и медью в качестве альтернативы обычным противомикробным препаратам. Pol J Vet Sci. 2016; 19 (4): 917–24.

CAS Статья Google ученый

17.

Хориэ М., Огава Х., Йошида Ю., Ямада К., Хара А., Одзава К., Мацуда С., Мизота С., Тани М., Ямамото Ю. и др. Инактивация и морфологические изменения вируса птичьего гриппа ионами меди. Arch Virol. 2008. 153 (8): 1467–72.

CAS Статья Google ученый

18.

Шахабади Н., Аббаси А.Р., Мошткоб А., Шири Ф. Исследования связывания ДНК нового комплекса Cu (II), содержащего ингибитор обратной транскриптазы и лекарство против ВИЧ, залцитабин.J Coord Chem. 2019; 72 (12): 1957–72.

CAS Статья Google ученый

19.

Sucipto TH, Churrotin S, Setyawati H, Kotaki T, Martak F, Soegijanto S. Противовирусная активность ДИГИДРАТА хлорида меди (ii) против вируса денге ТИПА-2 в клетке VERO. Индонезия J Trop Infect Dis. 2017; 6 (4): 84–7.

Артикул Google ученый

20.

Джопп М., Беккер Дж., Беккер С., Миска А., Гандин В., Марцано С., Шиндлер С.Противораковая активность ряда комплексов меди (II) с триподальными лигандами. Eur J Med Chem. 2017; 132: 274–81.

CAS Статья Google ученый

21.

Sagripanti JL, Routson LB, Bonifacino AC, Lytle CD. Механизм медь-опосредованной инактивации вируса простого герпеса. Антимикробные агенты Chemother. 1997. 41 (4): 812–7.

CAS Статья Google ученый

22.

Betanzos-Cabrera G, Rez FJR, Oz JLM, Barrn BL, Maldonado R. Инактивация HSV-2 аскорбатом-Cu (II) и оценка его защиты от энцефалита у мышей CF-1. J Virol Methods. 2004. 120 (2): 161–5.

CAS Статья Google ученый

23.

Wen-Jie G, Si-Si Y, Ning C, Juan H, Jing G, Qiu-Yun C. Аутофагия, опосредованная ROS, участвовала в гибели раковых клеток, вызванной новым комплексом меди (II). Экспериментальная и токсикологическая патология: официальный журнал Gesellschaft fur Toxikologische Pathologie.2010. 62 (5): 577–82.

24.

Штраух Б.М., Ниманд Р.К., Винкельбайнер Н.Л., Хартвиг ​​А. Сравнение микро- и наноразмерного оксида меди и водорастворимого хлорида меди: взаимосвязь между внутриклеточными концентрациями меди, окислительным стрессом и реакцией на повреждение ДНК в клетках легких человека. Часть Fiber Toxicol. 2017; 14 (1): 17–28.

Артикул Google ученый

25.

Ядав Б., Веннерберг К., Айттокаллио Т., Тан Дж.Поиск синергизма лекарств в сложных ландшафтах доза-реакция с использованием модели эффективности взаимодействия. Comput Struct Biotechnol J. 2015; 13 (C): 504–13.

CAS Статья Google ученый

26.

Рифкинд Дж. М., Шин Я., Хайм Дж. М., Эйххорн Г. Л.. Кооперативное разупорядочение одноцепочечных полинуклеотидов посредством сшивания меди. Биополимеры. 1976; 15 (10): 1879–902.

CAS Статья Google ученый

27.

Копитц Дж., Фон Рейценштейн С., Мюль С., Канц М. Роль ганглиозид сиалидазы плазматической мембраны клеток нейробластомы человека в контроле роста и дифференцировке. Biochem Biophys Res Commun. 1994; 199 (3): 1188–93.

CAS Статья Google ученый

28.

Мияги Т., Хата К., Хасегава А., Аояги Т. Дифференциальное действие различных ингибиторов на четыре типа сиалидазы крыс. Glycoconj J. 1993; 10 (1): 45–9.

CAS Статья Google ученый

29.

РАФЕЛЬСОН MJ, SCHNEIR M, WILSON VJ. Исследования нейраминидазы вируса гриппа. II. Дополнительные свойства ферментов азиатских штаммов и PR 8. Arch Biochem Biophys. 1963; 103: 424–30.

CAS Статья Google ученый

30.

Howe C, Morgan C. Взаимодействие между вирусом Сендай и эритроцитами человека. J Virol. 1969; 3 (1): 70–81.

CAS Статья Google ученый

31.

Ianevski A, He L, Aittokallio T, Tang J. SynergyFinder: веб-приложение для анализа данных матрицы доза-реакция на комбинацию лекарств. Биоинформатика (Оксфорд, Англия). 2017; 33 (15): 2413–5.

Артикул Google ученый

32.

Гловер З.К., Баса Л., Мур Б., Лоуренс Дж. С., Сридхара А. Взаимодействие ионов металлов с моноклональными антителами: Часть 1, том. 7; 2015.

Google ученый

33.

Смит М.А., Истон М., Эверетт П., Льюис Г., Пейн М., Риверос-Морено В., Аллен Г. Специфическое расщепление иммуноглобулина G ионами меди. Int J Pept Protein Res. 1996. 48 (1): 48–55.

CAS Статья Google ученый

34.

Belczyk-Ciesielska A, Zawisza IA, Mital M, Bonna A, Bal W. Последовательно-специфический Cu (II) -зависимый гидролиз пептидной связи: сходства и различия с Ni (II)-зависимой реакцией. Inorg Chem. 2014. 53 (9): 4639–46.

CAS Статья Google ученый

35.

Protas AM, Bonna A, Kopera E, Bal W. Селективный гидролиз пептидной связи цистеиновых пептидов в присутствии ионов Ni (II). J Inorg Biochem. 2011; 105 (1): 10–6.

CAS Статья Google ученый

36.

Salinas BA, Sathish HA, Shah AU, Carpenter JF, Randolph TW. Буфер-зависимая фрагментация гуманизированного полноразмерного моноклонального антитела.J Pharm Sci. 2010. 99 (7): 2962–74.

CAS Статья Google ученый

37.

Yanli Z, Xiaoqing C, Ying Y, Kai W, Hongwei D, Chao G, Songtao Y, Guixue H: выделение и филогенетический анализ трех штаммов калицивируса кошек от домашних кошек в провинции Цзилинь, Китай. Arch Virol. 2017; 162 (9): 2579–89.

38.

Цуй З, Ли Д., Йи С., Го И, Донг Дж, Ню Дж, Чжао Х, Чжан И, Чжан С., Цао Л. и др. Фрагменты F (ab ‘) 2 конского иммуноглобулина защищают кошек от кошачьей калицивирусной инфекции.Int Immunopharmacol. 2019; 75.

39.

Jasenosky LD, Cadena C, Mire CE, Borisevich V, Haridas V, Ranjbar S., Nambu A, Bavari S, Soloveva V, Sadukhan S, et al. Одобренный FDA пероральный препарат нитазоксанид усиливает противовирусный ответ хозяина и подавляет вирус Эбола. iScience. 2019; 19: 1279–90.

CAS Статья Google ученый

Антивирус, используемый для лечения кошачьего коронавируса, также работает против SARS-CoV-2: исследователи U of A

Исследователи из Университета Альберты готовятся к запуску клинических испытаний препарата, используемого для лечения смертельного заболевания, вызванного коронавирусом, у кошек, которое, как они ожидают, также будет эффективным для лечения людей от COVID-19.

«Всего за два месяца наши результаты показали, что препарат эффективен в подавлении репликации вируса в клетках с SARS-CoV-2», — сказала Джоан Лемье, профессор биохимии факультета медицины и стоматологии.

«Этот препарат, скорее всего, подействует на людей, поэтому мы воодушевлены тем, что он станет эффективным противовирусным средством для лечения пациентов с COVID-19».

Препарат представляет собой ингибитор протеазы, который препятствует репликации вируса, тем самым прекращая инфекцию.Протеазы являются ключевыми для многих функций организма и являются общей мишенью для лекарств для лечения всего, от высокого кровяного давления до рака и ВИЧ.

Ингибитор протеазы, впервые изученный химиком Джоном Ведерасом и биохимиком Майклом Джеймсом после вспышки тяжелого острого респираторного синдрома (SARS) в 2003 году, был дополнительно разработан ветеринарными исследователями, которые показали, что он излечивает болезнь, которая является смертельной для кошек.

Работа по тестированию препарата против коронавируса, вызывающего COVID-19, была результатом совместных усилий четырех лабораторий U of A, которыми руководили Лемье, Ведерас, профессор биохимии Говард Янг и директор-основатель Института вирусологии Ли Ка Шинга. , Лорн Тиррелл.Некоторые эксперименты проводились в рамках программы структурной молекулярной биологии источников синхротронного излучения и света в Стэнфорде.

Их результаты были опубликованы сегодня в рецензируемом журнале Nature Communications после того, как они впервые были опубликованы на исследовательском веб-сайте BioRxIV.

«В исследованиях COVID существует правило, согласно которому все результаты должны публиковаться немедленно», — сказал Лемье, поэтому они были опубликованы перед рецензированием.

Она сказала, что интерес к работе высок, и к статье обращались тысячи раз, как только она была опубликована.

Лемье объяснил, что Ведерас синтезировал соединения, и Тиррелл проверил их против вируса SARS-CoV-2 в пробирках и в линиях клеток человека. Затем группы Янга и Лемье раскрыли кристаллическую структуру лекарства, поскольку оно связывается с белком.

«Мы определили трехмерную форму протеазы с лекарством в кармане активного сайта, показав механизм ингибирования», — сказала она. «Это позволит нам разработать еще более эффективные лекарства».

Лемье заявила, что продолжит испытания модификаций ингибитора, чтобы он лучше подходил для вируса.

Но она сказала, что нынешний препарат обладает достаточным противовирусным действием против SARS-CoV-2, чтобы немедленно приступить к клиническим испытаниям.

«Обычно для того, чтобы лекарство попало в клинические испытания, оно должно быть подтверждено в лаборатории, а затем испытано на животных моделях», — сказал Лемье. «Поскольку этот препарат уже использовался для лечения кошек с коронавирусом, и он эффективен, практически не токсичен, он уже прошел эти стадии, и это позволяет нам двигаться вперед».

«Благодаря убедительным данным, которые мы и другие собрали, мы проводим клинические испытания этого препарата в качестве противовирусного средства от COVID-19.«

Исследователи установили сотрудничество с Anivive Life Sciences, ветеринарной медицинской компанией, которая разрабатывает лекарство для кошек, чтобы производить лекарство того качества и количества, которое необходимо для клинических испытаний на людях. Лемье сказал, что он, вероятно, будет протестирован в Альберте в сочетании с другими многообещающими противовирусными препаратами, такими как ремдесивир, первый препарат, одобренный для условного использования в некоторых странах, включая США и Канаду.

Работа исследователей U of A финансировалась Канадскими институтами медицинских исследований, Советом по естественным и инженерным исследованиям Канады, Alberta Innovates, Институтом вирусологии Ли Ка Шинга и кафедрой вирусологии GSK.

.